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【试验旨在】（1）研究会恰当采用病原体试验之中特指的感染方法，握有各种感染关键技术。（2）通过观察病原体的培植形态，研究会判别病原体在相同菌种上的潮湿情形。【试验理论】1．冷冻感染关键技术冷冻感染关键技术是病原体深入研究之中最前提的加载关键技术之一。是非感染即把病原体稀细菌在冷冻必需下移植版到适于的菌种上，经培植得到稀培植器皿。因此，感染一般敦促在无菌室、超净构件（所示2安1）或研究所火球对面宽松按无菌操作开展。根据试验旨在的相同，改用的感染新方法也相同，一般可分作侧向感染、智能手机感染、气体感染、针头感染等。侧向感染：大概已潮湿好病原体的侧向上挑取少量细菌移植版至另一食材错位侧向菌种上的感染新方法。它是细菌培植的最特指新方法之一。智能手机感染：是用感染环将细菌接至智能手机菌种上，或用移液管将一定尺寸的菌液移往智能手机菌种上，然后开展培植。它主要用做细菌特征通过观察、分开制备细菌、活菌枚举或其他试验中。针头感染：是主要用做感染微生物、检查和病原体的青年运动技能或珍藏细菌的一种感染新方法。感染时，将沾取细菌的感染钩从半晶体菌种颗粒向前针头，在吻合管底处，感染针再循徒步放入。气体感染：是将侧向细菌或气体细菌感染到气体菌种之中的一种新方法。它用做细菌的气体培植或气体菌种之中潮湿形态的通过观察。2．细菌培养形态通过观察培植形态是就是指病原体在菌种上所发挥的社会群体特征和潮湿情形。在一定的培植必需下，相同的病原体培植形态不尽相同，这是辨识各种病原体的依据之一。细菌培养形态一般用晶体、半晶体和气体菌种开展培植通过观察，其中晶体菌种又分智能手机和侧向两种型式。侧向菌种上的菌苔形态：逐级在侧向菌种上挂钩线段感染，经培植，相同的病原体可以描绘出管状、绒毛螺旋状、蜡烛螺旋状、较厚螺旋状、管状或假根螺旋状等相同的菌苔形态。智能手机菌种上的细菌形态：把细菌培养在智能手机上，主要通过观察细菌的特征、凹陷及外缘等情形，例如细菌的形状，颗粒少雨素质，凹陷、扁平或隆起，柔软或柔软，外缘整洁或不整洁，细菌光亮、外壳或不光亮，黄色以及坚硬等，如图2安2下图。气体菌种之中的潮湿形态：病原体在气体菌种中亦有三种潮湿情形。大多数病原体在气体菌种之中潮湿产卵后椭圆形微小浑浊；少数线状排列成的病原体（如病原体、病菌微生物细菌）等则椭圆形沉淀物潮湿；枯草微生物细菌、胃癌弧菌和锇真单胞菌等专性需氧菌一般椭圆形颗粒潮湿，最常成形菌膜。半晶体菌种之中的潮湿形态：半晶体菌种主要用做病原体流体力学试验中。有丝状的病原体除了沿针头支线潮湿以外，在针头支线两边也可见羽毛状或缭绕螺旋状浑浊潮湿。无丝状的病原体情况下沿针头支线椭圆形突出的不规则潮湿，针头支线两端的菌种一直否认光亮。【试验仪器】1．细菌菌株（Escherichia coli）、枯草微生物细菌（Bacillus subtilis）、紫红色杆菌（Stap hyloccocus aureus）、孢子螺旋状微生物细菌（Bacillus mycoides）、粘质沙雷氏霉菌（Serratia marcescens）等。2．菌种肉类汁蛋白胨井水菌种（侧向、气体、半晶体）。3．科学仪器和用品感染环中、感染钩、涂棒等感染方法（所示2安3）。容器、移液管、滴管、试管、培养箱、酒精灯等。【试验流程】1．侧向感染1）贴标签：感染年前在距容器侧2～3cm一段距离上贴上标签，标示菌名、感染时间表等。2）燃烧酒精灯。3）挥舞容器：将容器抽于手指之中，要用手臂松开，使两支容器椭圆形“S”形。4）感染环中杀菌（所示2安4）：用火球将感染环烧蓝，然后将感染环中路程通过火球数次。5）拔管帕：用食指、手指和手指迭下容器帕，并夹于手上。容器侧向上可笑杀菌，务必烧成过擦拭。6）收细菌：将烧过的感染环中伸向细菌上行，再将环中碰触一下并未长菌的菌种大部分，使其蒸发，便嘴唇沾取少量菌种或细菌，然后将感染环中移到细菌管。特别注意：不该使感染环中的大部分跑到表面张力，放进后不必使感染环中通过火球。7）感染：在火球对面不断将洒有细菌的感染环中伸向另一支待感染侧向容器。从侧向菌种的顶端向上半部认真“之”形稀疏填入。特别注意：务必撕开菌种。也只用感染针在侧向菌种的和中央划为一条线段感染，可通过观察相同细菌的潮湿特色。8）塞管帕：放进感染环中，熔化容器侧，并在火球对面将管塞旋上。特别注意：帕棉塞时，不该旋转容器，以免容器在旋转时归属于洁净热空气。以上说明了的无菌操作流程见图2安5。9）熔化感染环中：将感染环中熔化杀菌后放回原位。10）培植：将感染好的容器于37℃培养箱之中培植，24h后通过观察潮湿情形。3．气体感染（1）侧向细菌感染气体菌种1）感染年前的加载：同上。2）感染：用感染环取少量侧向细菌迁入菌种液体（容器或尖角试管等）之中，将感染环在气体颗粒震荡或与液体内壁嘴唇摩擦力，使菌苔盘旋。放进感染环中，塞好棉塞，便嘴唇用力气体，使菌种给定在气体之中。3）培植：将感染好的容器四肢于37℃培养箱之中培植，24h后通过观察潮湿情形。（2）气体培植器皿感染气体菌种1）感染年前的加载：同上。2）感染：收冷冻移液管（或移液器），伸向细菌上行吸收辅料菌液，接上到待感染的气体菌种内。塞好棉塞，便嘴唇用力气体，使菌种给定。3）培植：将感染好的容器四肢于37℃培养箱之中培植，24h后通过观察潮湿情形。4．针头感染1）挥舞容器：按侧向感染法则拇指细菌管和半晶体菌种管，紧邻火球。2）收细菌：将感染针在火球上刺破杀菌，蒸发后从细菌气管挑取少许待接菌菌苔，不断移往半晶体菌种气管。3）针头感染（所示2安6）：将感染钩从菌种和中央度角刺中管部3/4地底，然后沿原路抽回。特别注意：感染钩不会在菌种之中约旋转，情况下有一条针头支线。4）塞管帕：容器口经火球杀菌后，鸡鸣棉塞。熔化感染钩。5）培植：将感染好的容器放置37℃培养箱之中培植，24h后通过观察潮湿情形。5．智能手机感染（1）填入法则1）撑智能手机（所示2安7）：将蒸发的酵母菌菌种蒸发至45℃约，在酒精灯火球对面，用双手的手指及食指夹持棉塞，双手开启冷冻试管中空的不停，双手握尖角试管向试管里头流入20mL约的菌种。将试管略作旋转轴用力后，放置技术水平一段距离待融。2）填入：在酒精灯火球上熔化感染环中，待其蒸发后，以无菌操作收少量菌苔或菌液，伸向箸内，在智能手机上的一个范围沿“之”形路程填入（种系统详见试验9）。填入时，使感染环在酵母菌颗粒来作活泼旋转，务必撕开颗粒。3）培植：填入再行后，熔化感染环中，在皿底用记号笔标示细菌名字、时间表、姓氏（或学号），将试管反转取出37℃空调系统培养箱之中培植。（2）同一天感染法则一般用做细菌细菌通过观察的感染新方法。1）撑智能手机：同上。2）同一天感染：无菌操作下，用感染钩从侧向收少量细菌，针尖度角附近接上在智能手机菌种颗粒上，点接三次，感染结果见图2安8。特别注意：同一天椭圆形等边三角螺旋状，同一天仅座落试管的表面积之该中心。3）培植：将智能手机始终保持反转平衡状态取出培植箱子（切忌路程翻动），适温培植1周。（3）制成法则1）撑智能手机：同上。2）收菌液：用1mL冷冻瓶盖吸收经合理挥发的菌液0.2mg于智能手机之中。3）制成：用冷冻涂棒在智能手机颗粒微小制成（所示2安9）。4）培植：常压下晾干5～10min后，撑放置37℃恒温箱之中培植24～48h。【实验报告】1．试验结果通过观察并历史记录用相同感染新方法培植给予的病原体细菌特征形态，并本表非常几种病原体的细菌形态。2．思考题（1）用侧向感染通过观察病原体的培植形态时，为什么不该划为多条同方向盘龙支线，而只划一条线段？（2）好氮的、具周生丝状的大肠杆菌在半晶体针头和气体菌种之中的培植形态分别是怎样的？（张萍华）
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【固体培养基】冷冻感染关键技术及细菌培养形态通过观察——万融试验
核心提示：【试验旨在】（1）研究会恰当采用病原体试验之中特指的感染方法，握有各种感染关键技术。（2）通过观察病原体的培植形态，研究会判别病原体在相同菌种上的潮湿情形。【试验理论】1．冷冻感染关键技术冷冻感染关键技术是病原体深入研究之中最前提的加载关键
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