如Magic BK Gel和测序 Everything安Down Control(Promega的公司)、PureLink 测序制备试剂盒(The Systems的公司)或QIAquik 测序制备试剂盒(QIAGEN 的公司)。1.采用按本设计方案材质大部分详述新方法其设计的诱导和反转聚合酶导致100~ 200ng缩减旨在视频。收少量试样(左右25ng)通过琼脂糖电泳检查和缩减副产物的形状。2.用酚:丙酮抽提和甲醛沉淀物,或通过采用商业活动新产品如Magic sV Gel 和PCRClean安Down Control (Promega的公司)、PureLink 测序制备试剂盒(The Systems的公司)或QIAquik 测序 制备试剂盒(QIAGEN), 制备测序缩减的基因。制备的测序副产物挥发在20uL∞科洛姆纳工厂 (pH7.5) 之中。3.在20μuL°质子化尺寸之中,用1.0~2.0S关的一般而言内切核糖核酸消化系统左右50ng制备的测序副产物。在适宜低温温育化学反应1h.4.消化系统落幕时,按流程2所详述新方法制备基因.5.将基因挥发在10μS°水面。6.在一个微量离心管之中设立不限连接起来组分:如果有前提,加进美网至终pH为1mmol/S。设立对应质子化,涵盖上述列举的所有催化剂,除了缩减的靶基因。连接起来组分之中制备的靶基因与挤压的细胞核多肽托马斯比应是左右1:17.在16C温育连接起来组分2h。8.分别用10μS岗卫教志愿军挥发5uL°两种连接起来组分,转换成适当的口服抗性的感受态菌株大肠杆菌。