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血、尿中乙醇、甲醇、正丙醇、乙醛、丙酮、异丙醇、
正丁醇、异戊醇的定性分析的定量分析方法（顶空气相色谱法）
（GA/T105-1995）
1 顶空气相色谱法
1.1 适用范围：适用于低级醇类、醇性饮料中毒或中毒死亡者的血液和尿液中乙醇对血液、尿液样品中进行乙醇、甲醇、正丙醇、乙醛、丙酮、异丙醇、正丁醇、异戊醇的定性分析及乙醇、甲醇、正丙醇的定量分析。
1.2 原理：本法利用醇类的易挥发性，以叔丁醇为内标，用顶空气相色谱火焰离子化检测器进行检测,经与平行操作的醇类标准品比较，以保留时间定性；用内表法以醇类对内标物的峰面积比进行定量。
1.3 器材与试剂
气相色谱仪（配置火焰离子化检测器）；样品瓶（7ml青霉素瓶）
硅橡胶垫；聚四氟乙烯薄膜；铝帽；密封钳；注射器（1ml ）；
硫酸铵；甲醇标准溶液；叔丁醇
1.4 操作步骤
1.4.1 色谱条件 气相色谱仪
a） 色谱柱：（1）5%CARBOWAX20M Carbopack（80-120目）2mm 2m玻璃柱
（2）Porapak S（80~100目）2mm 2m玻璃柱
b） 柱温： 柱（1）程序升温：始温70℃，速率5℃/min，终点170℃（5min）
柱（2）程序升温：始温100℃，速率15℃/min，终点200℃（10min）
c） 检测器：火焰离子化检测器（FID）
d） 检测室温：230℃
e） 汽化室温：
210℃
f） 载气（N2）：流速20-35ml/min
1.4.2 定性分析
1.4.2.1 样品制备
取待测全血（或尿液）1ml加入样品瓶中，加100ul（2mg/ml）叔丁醇内标液，约1克硫酸铵，瓶口覆盖氟乙烯薄膜，硅橡胶垫，用密封钳加封铝帽，混匀，置60℃水浴中加热15 20min。
同时取空白全血（或尿液）两份，其中一份添加内标溶液100ul 和乙醇标准使用液20ul（20ug），按上述程序平行操作以进行空白对照和已知对照分析。
1.4.2.2进样
用1ml注射器分别吸取检材、空白对照和已知对照瓶内液面上的气体约0.5ml，注入气相色谱仪中，每个试样进样2~3次，并注入醇类标准溶液。
1.4.2.3记录与计算
分别记录各试样中内标物，醇类标准品和可疑醇峰的保留时间，填入GC定性分析结果中，计算它们的保留时间平均值，并以内标物的保留时间为1，计算醇的相对保留时间值。
1.5 定量分析
1.5.1样品制备
精密吸取待测全血（或尿液）0.5ml两份，分别加入样品瓶内，加100ul（2mg/ml）叔丁醇内标液，按1.5.2.1密封瓶口后，混匀，置60℃水浴中加热15 20min。
另取空白全血（或尿液）两份，根据检材中醇含量的多少，添加乙醇（或甲醇、正丙醇）标准使用液20ug 2mg，内标液100ul（200ug）按上述方法平行操作。
1.5.2检测 气相色谱仪
按1.5项中所述操作进行。
1.5.3记录与计算
1.5.3.1记录检材及空白添加标准品中乙醇（或甲醇、正丙醇）及内标物峰面积值，填入GC定量分析记录表中，并算出各检材乙醇（或甲醇、正丙醇）及内标物的平均峰面积值。
1.5.3.2计算相对校对因子
1.5.3.3计算检材中醇含量W（mg/100ml）
1.5.3.4计算相对相差
式中：W1，W2为两份检材平行定量测定的结果，W为两份检材平均值。
1.6 结果评价
1.6.1定性结果评价
1.6.1.1本法血、尿中乙醇、甲醇的zui低检出限为1ug/ml。正丙醇的zui低检出限为10 ug/ml。如果添加于空白检材中20ug乙醇出现相应的色谱峰，而检材未出现相应的醇类色谱峰，可以认为检材中不含醇类，阴性结果可靠。如果添加于空白检材中20ug乙醇未出现相应的色谱峰，而检材未出现醇类色谱峰，属操作有误，阴性结果不可靠，应重新检验。
1.6.1.2如果空白检材未见出醇类色谱峰，而检材有醇类色谱峰时。说明空白无干扰，阳性结果可靠，经不同的色谱条件，结果一致时一般可以认定检材中含有某种醇类物质。必要时，用GC/MS确证。
1.6.2定量分析结果评价
两份检材的相对差若不超过15%时，结果按两份检材含量的平均值计算，相对相差若超过15%，需重新进行测定。
血、尿中乙醇、甲醇、正丙醇、乙醛、丙酮、异丙醇、
正丁醇、异戊醇的定性分析的定量分析方法（顶空气相色谱法）
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