近日有位老客户,实验中OD值出现读值不正常的原因有哪些,现为您一一解答。
首先我们先来了解下何为 OD 值:OD是optical density(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度,是检测方法里的专有名词,检测单位用OD值表示,1OD=1og(1/trans),其中trans为检测物的透光值,光通过被检测物,前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量,特定波长下,同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。
在elisa试剂盒实际实验步骤中的影响因素较多,熟练的掌握操作技巧必定会事半功倍。下面来列举下影响 OD 值不正常的因素:
1、试剂盒未回温(对应解决方法:试剂盒回温到25℃)
2、温度控制不好(对应解决方法:控制正确温度)
3、孵育时间不准确(对应解决方法:控制孵育时间)
4、洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增加(对应解决方法:洗涤4-5次,每孔250ul,然后拍干)
5、阳光直射,对着风直接吹(对应解决方法:避风避阳)
6、酶标仪的波长错误elisa试剂盒(对应解决方法:酶标仪的波长450nm)
7、抗体的稀释错误(对应解决方法:正确的稀释抗体)
8、水质问题(对应解决方法:用娃哈哈矿泉水代替)
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