伊红染色液（水溶）_常用试剂-上海研谨生物科技有限公司

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伊红染色液(水溶,5%)

产品简介：

伊红(Eosin)又称曙红，属人工合成染料中的呫吨类染料，为桃红色或粉红色的粉末。  分子式为 C20H6O5Br4Na2，分子量为 691.86。伊红最适宜于苏木精配合染色以显示正常或病理组织的形态结构。水溶性伊红 Y 含有一个醌型苯环的发色团和两个形成钠盐的酸性助色团(R-COONa、R-ONa)。这种形成盐类的酸性染料在水中溶解时解离为带负电荷的色酸部分(R-COO 、R-O )，即染料的有色部分和带正电荷的钠离子部分(Na+)。染色时伊红 Y 带负电荷的色- 酸部分-不组织内带正电荷的物质以离子键的形式结合而显色。

伊红染色液(Eosin Y Stain)采用特有防腐剂，操作简单，不使用汞、甲醇等有毒试剂，可以用于组织切片或培养细胞的染色。可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。一方面可以在伊红染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫组化染色后再进行伊红复染。本染色液可以重复使用，直至认为效果不佳时再换用新的染色液，染色后细胞浆呈粉红色或红色。

产品组成：Eosin Y Stain(5%) 100ml 500ml RT 避 光

自备材料：

1、蒸馏水

2、4%多聚甲醛

3、系列乙醇

操作步骤(仅供参考)：

根据实验具体要求操作，如果用于普通染色应稀释后，参考如下步骤：

1、样品处理

a) 对于石蜡切片:

二甲苯中脱蜡 5~10min。

换用新鲜的二甲苯，再脱蜡 5~10min。无水乙醇 5min。

90%乙醇 2min。

70%乙醇 2min。蒸馏水 2min。

b) 对于冰冻切片:

蒸馏水 2min。

用4%多聚甲醛固定 10min 以上。蒸馏水洗涤2分钟。

换用新鲜的蒸馏水，再洗涤 2min。

2、伊红染色：对于上述处理好的样品，伊红染色液染色  0.5~2min(根据染色结果和要求调整时间)。如果需要直接观察，可以用 70%乙醇洗涤2 次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。

注：如果用于免疫组化等染色后的复染，参考上述步骤在其它染色完成后进行伊红染色。

3、脱水、透明、封片或进行其它染色a)脱水、透明、封片：

95%乙醇脱水 2min。

换用新鲜的 95%乙醇再脱水 2min。二甲苯透明 5min。

换用新鲜的二甲苯，再透明 5min。用中性树胶或其它封片剂封片。

显微镜下观察，细胞浆呈粉红色或红色。

b)进行其它染色：

如果进行免疫荧光染色，或进行 Hoechst 等荧光染料的染色，在伊红染色液染色后：

70％乙醇洗涤 2 次，每次2min。

PBS 或生理盐水或 TBS 或 TBST 等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5min。

进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色。