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DND-41细胞,急性淋巴细胞B细胞白血病细胞
细胞培养的基本原理与技术 现代生物技术一般认为包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术和发酵工程技术,而这些技术的发展几乎都与细胞培养有密切关系,特别是在医药领域的发展,细胞培养更具有特殊的作用和价值。
DND-41细胞,急性淋巴细胞B细胞白血病细胞
细胞代号:
DND-41细胞名称:
DND-41细胞,急性淋巴细胞B细胞白血病细胞
组织来源:
血液、淋巴组织haematopoietic_and_lymphoid_tissue对应疾病:
急性淋巴细胞B细胞白血病acute_lymphoblastic_T_cell_leukaemia
生长特性:
细胞来源:
从ATCC/中科院/协和医院等地引进
培养条件:
培养基: DMEM +10%FBS
气相:空气95%,二氧化碳5%
温度:37℃
培养:
一、贴壁细胞
1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行2-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代;
2.待细胞长满瓶底面积80%-90%,需要对其进行传代,第一次传代比例为1:2。
3传代步骤:将0.25%含EDTA胰酶置于37 预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入1mlPBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1ml预热好的胰酶,置于37 孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为消化时间,记录消化时间,以便于下次消化),消化好后加入1ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。
二、悬浮细胞
1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒,然后置于无菌操作台,打开瓶口,轻轻吹打后,将其中的细胞悬液转移到离心管中,然后1200rpm离心3min,去上清;
2.将离心好的细胞转移至T-25瓶中,并加入5-6mL新鲜培养基,然后将其置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液(离心后去旧液,加入新鲜培养基);
3.显微镜观察细胞数目比较多时,对其进行传代,第一次传代比例为1:2(离心后平均分成两瓶培养)。
细胞总数:
1~3*106
传代周期:
2-3天
传代比例:
1:2~1:4
换液频率:
2-3天
冻存液:
90%FBS+10%DMSO
注意事项:
1 收到细胞后首先观察T-25瓶是否有损坏、漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2 瓶中运输的培养液不能重复使用,请换新鲜培养液培养
3 对于贴壁细胞,若大部分细胞漂浮,置于培养箱隔夜观察,大部分漂浮细胞重新贴壁,表明细胞活力正常,继续培养,剩余漂浮的细胞可以去掉;若大部分细胞仍然不贴壁,将漂浮的细胞离心收集,用台盼蓝染色鉴定细胞活力,并与本公司销售人员及时联系。
4 建议客户收到细胞后不同倍镜各拍几张细胞的照片,记录细胞状态,如细胞状态出现问题请于一周内与本公司销售联系,以便于更好的帮您解决问题,超过时间我段,本公司则默认细胞状态良好,不免费对后续细胞状态问题进行售后。
5 因细胞产品的特殊性,如客户对本公司细胞质量存有疑问,请于收到细胞后1月内与本公司销售联系,超过时间段,本公司则默认细胞质量优良,不承担因细胞产生的任何责任。
Noverse细胞库建立有标准化GMP细胞培养车间,保藏细胞种类2000余,从来源、引进、培养、冻存、复苏、运输,注重每一个环节,提供活力强,代数靠前,优质细胞株细胞系。
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