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死活细胞测定及细胞活力测定实验原理_91化工仪器网

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放大字体  缩小字体    发布日期:2019-09-02  来源:仪器信息网  作者:Mr liao  浏览次数:435
核心提示:(1)干细胞细胞膜通透性的差异:活细胞的细胞膜是一种选择性膜,对细胞起保护和屏障作用,只允许物质选择性的通过;而细胞死亡之后,细胞膜受损,通透性增加。(2)死活细胞在代谢上的差异:由于活细胞中新陈代谢的作用,使细胞内具有较强的还原能力,而死细胞或代谢缓慢的老细胞,则因它们的无还原能力或还原能力极弱。常见的细胞染料有:中性红(细胞器的专有染料)、台盼蓝、甲基蓝、美蓝、荧光素双醋酸酯(FDA)等。① 中性红染色:常用染料之一,是细胞器的专有染料。利用干细胞膜的通透性差异,用来染原生动物和显示动植物组织中活细胞

(1)干细胞细胞膜通透性的差异:活细胞的细胞膜是一种选择性膜,对细胞起保护和屏障作用,只允许物质选择性的通过;而细胞死亡之后,细胞膜受损,通透性增加。

(2)死活细胞在代谢上的差异:由于活细胞中新陈代谢的作用,使细胞内具有较强的还原能力,而死细胞或代谢缓慢的老细胞,则因它们的无还原能力或还原能力极弱。

常见的细胞染料有:中性红(细胞器的专有染料)、台盼蓝、甲基蓝、美蓝、荧光素双醋酸酯(FDA)等。

① 中性红染色:常用染料之一,是细胞器的专有染料。利用干细胞膜的通透性差异,用来染原生动物和显示动植物组织中活细胞的内含物等。中性红无毒,常做活体染色的染料。

② 台盼蓝染色:当细胞损伤或死亡时,台盼蓝可穿透变性的细胞膜,与解体的DNA 结合,使其着色。而活细胞能阻止染料进入细胞内。故可以鉴别死细胞与活细胞。严格来说,台盼蓝染色检测的是细胞膜的完整性,通常认为细胞膜丧失完整性,即可认为细胞已经死亡。通过显微镜很容易就能识别出死亡的被台盼蓝染色的细胞,并可使用细胞计数器进行计数。

③ 美蓝染色法:美蓝是一种无毒性染料,它的氧化型是蓝色的,而还原型是无色的,用它来对活细胞进行染色,由于细胞中新陈代谢的作用,使细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝从蓝色的氧化型变为无色的还原型,所以活细胞无色,而对于死细胞或代谢缓慢的老细胞,则因它们无此还原能力或还原能力极弱,而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。因此,用美蓝水浸片不仅可观察酵母的形态,还可以区分死、活细胞.

④ 干细胞甲基蓝染色法:甲基蓝染色与台盼蓝类似的染色机理。


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