MAP2抗体,微管相关蛋白2抗体
提供各种抗体标记服务:辣根过氧化物酶标记 荧光素标记 生物素标记 胶体金离子标记,将辣根过氧化物酶(HRP),荧光素(FTIC、RBITC、Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7、APC、PE),生物素(Biotin)及胶体金离子(CO-AO)等四类能量高、显示快的分子,以共价键和离子键的方式连接到抗体或抗原蛋白分子上,制备成高度灵敏和特异性的分子探针,广泛用于医学病理学、免疫组织化学、分子生物学、生物制药与兽医药研究等领域的分析研究与技术测定。
抗体详细介绍:
产品编号 Rs-1369R
英文名称 Anti-MAP2
中文名称 微管相关蛋白2抗体
抗体详细介绍:MAP2 is the major microtubule associated protein of brain tissue. There are three forms of MAP2; two are similarily sized with apparent molecular weights of 280 kDa (MAP2a and MAP2b) and the third with a lower molecular weight of 70 kDa (MAP2c). In the newborn rat brain, MAP2b and MAP2c are present, while MAP2a is absent. Between postnatal days 10 and 20, MAP2a appears. At the same time, the level of MAP2c drops by 10-fold. This change happens during the period when dendrite growth is completed and when neurons have reached their mature morphology. MAP2 is degraded by a Cathepsin D-like protease in the brain of aged rats. There is some indication that MAP2 is expressed at higher levels in some types of neurons than in other types. MAP2 is known to promote microtubule assembly and to form side-arms on microtubules. It also interacts with neurofilaments, actin, and other elements of the cytoskeleton.
别 名 DKFZp686I2148; Dendrite specific MAP; DKFZp686I2148; MAP 2; MAP-2; MAP2A; MAP2B; MAP2C; Microtubule associated protein 2; Mtap 2.
产品类型 一抗
交叉反应 hu, mo, rat
蛋白分子量 Predicted Molecular Weight: 205
性状 Lyophilized or Liquid
浓度 1mg/1ml
免疫原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human MAP2
亚型 IgG
产品应用 WB=1:100-500 Elisa=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1/20-1/100
(石蜡切片需做抗原修复)
Not yet tested in other applications.
Optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
MAP2抗体,微管相关蛋白2抗体 现货供应中
相关知识:
抗体的制备 多克隆抗体的制备
*动物的选择
*佐剂(adjuvant)
*免疫方法
*免疫剂量
*抗体效价的测定
*放血或定期抽血
(1) 动物的选择
选择什么动物来免疫取决于:
*所需抗血清的量
-小鼠只能提供1.0~1.5ml的血液,而山羊能提供几升。
*能供免疫用的抗原量
-小鼠50?g足够,而山羊需要几毫克。
(1) 动物的选择(续)
*动物的品系:免疫动物与提供抗原的动物之间的种系差异越大越好。
-例如哺乳动物的抗原可选择非哺乳动物来制备抗体。
-常用的动物有兔、羊、马、猪等,以兔(新西兰兔,年轻,健壮,体重在2.5kg左右,雄性)为zui常用。
(2) 佐剂 (adjuvant)
*一般可溶性抗原注射后,迅速从注射部位扩散、吸收代谢。佐剂可延长潴留时间,且延长免疫刺激作用。因此在制备抗体的过程中,常将抗原和佐剂一起注射。
*zui常用的佐剂是弗氏佐剂,又分为:
-弗氏不完全佐剂(Freund's incomplete adjuvant)
-弗氏完全佐剂(Freund's complete adjuvant)
弗氏不完全佐剂
(Freund's incomplete adjuvant, FIA)
*是由油剂(石蜡油或植物油)与乳化剂(羊毛脂或Tween80)混合而成,比例为1:1、2:1、3:1或5:1,可根据需要而定,通常2:1。
*使用时与水溶性抗原按1:1比例充分混合,使抗原分散在佐剂中形成油包水乳剂。
弗氏完全佐剂 (Freund's complete adjuvant, FCA)
*在弗氏不完全佐剂中加入活卡介苗或死的结核分枝杆菌(终浓度为2~20mg/ml),即成为FCA。
*免疫动物时,将弗氏佐剂与抗原按体积 1:1 混合乳化后(油包水)注入动物。
-一般首次注射时用完全佐剂乳化,第二次或第三次注射时用不完全佐剂或不用佐剂。
佐剂与抗原乳化的方法
*研磨法:适于制备大量的佐剂抗原
-先将不完全佐剂加热,取1.73ml放人无菌玻璃研钵内;缓缓滴入0.23ml活卡介苗,边滴边按同一方向研磨,使菌体完全分散。
-按同样方法滴人抗原,每加一滴应研磨至小滴消失。滴加抗原的速度要慢,待抗原全部加人后,应成为乳白色粘稠的油包水乳剂。
*缺点:研钵壁上粘附大量乳剂,抗原损失较大,对微量或难得抗原不宜采用。
佐剂与抗原乳化的方法(续)
*注射器混合法
-将等量的完全佐剂和抗原分别吸人两个5ml注射器内,然后插入三通管内,交替推动针管混匀,往复操作直至形成粘稠的乳剂为止。
*优点:无菌操作,节省抗原或佐剂。
*缺点:不易乳化,时间长。
佐剂与抗原乳化的方法(续)
*快速乳化法:利用超声波粉碎器可快速乳化抗原和佐剂混合物。
-将抗原和佐剂按所需量加入一离心管中,置于超声波粉碎器上,粉碎头浸入液面下 0.5cm,离瓶底0.5cm左右,以免打碎离心管。
-每次乳化 10~15s,然后置冰箱lmin左右。反复乳化3~4次即可完全乳化。管内残余量800r/min离心5~10min收集。
*优点:简单、快速、节省材料。
乳化剂的鉴定
*判断乳化是否充分,可将一滴乳化好的液体滴在水面上(冷水中),如能长时间保持圆珠形而不散开,表示乳化达到要求。
(3) 免疫方法 免疫途径
*常有静脉、腹腔、肌肉、皮下、皮内、淋巴结、脚掌等注射。
*一般采用多点注射方法
-常在足、掌、腋窝淋巴结周围、背部两侧、颌下、耳后等处的皮内或皮下。
-皮内易引起细胞免疫反应,有利于提高抗体的效价。
(3) 免疫方法 免疫途径 (续)
*几点说明:
-大动物一般不用腹腔注射
-颗粒抗原和使用佐剂时不能静脉注射
-抗原宝贵可采用淋巴结内微量注射法,只需10~100?g抗原即可获得较好的免疫效果。
-皮内注射较困难,特别是天冷时更难注入。
(3) 免疫方法 次数及间隔时间
*次数一般为2~3次(初次免疫和加强免疫)
-首次注射后,10~15天再加强注射;
-剂量同首次或为首次的一半,用不全佐剂或不用佐剂。
*间隔时间,一般而言,动物越大,间隔越长
-豚鼠、大鼠为7~8天,兔子为10~15天,羊为14~28天;
-第三次注射的间隔时间更长些,效果更好。
举例1:家兔的免疫
*初次免疫
-用50~200?g Ag加入FCA,在背部皮下注射6~8点,每点0.1~0.2ml,也可肌肉内或皮内注射;
*两周后,加强免疫
-将50~200?g Ag于PBS或FIA中,在肌肉、皮下、静脉或腹腔内注射;
*抗体效价的检测:加强免疫一周后,耳缘静脉采血
-抗体效价测定可用环状沉淀试验、琼脂双向扩散法等方法。前者抗体效价在1:4000以上,后者在1:16以上,即可采血,取血清进一步提纯。