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-半乳糖苷酶（ -GAL）测试盒 可见分光光度法
货号：BC2580
规格：50管/24样
测试方法：可见分光光度法
测定意义：
-GAL(EC 3.2.1.23)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，能够催化 半乳糖苷化合物中 半乳糖苷键水解，此外还具有转半乳糖苷的作用。 -GAL不仅可为植物的快速生长释放储存的能量，还能在正常的多糖代谢、细胞壁组分代谢以及衰老时细胞壁降解过程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖残基的水解，释放自由的半乳糖。
测定原理：
-GAL分解对-硝基苯- -D-吡喃半乳糖苷生成对-硝基苯酚，后者在400nm有大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算 -GAL活性。
自备用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
产品内容：
提取液：液体50mL 1 瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂 1 瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入5mL 蒸馏水，充分溶解备用；用不完的试剂仍-20℃保存。
试剂二：液体15mL 1 瓶，4℃保存。
试剂三：液体80mL 1 瓶，4℃保存。
标准液：液体1ml 1支，4℃保存，10 mol/ml对硝基苯酚溶液。
操作步骤：
一、 粗酶液提取：
1、 细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为500~1000：1 的比例（建议500 万细菌或细胞加入1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30 次）；15000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 提取液），进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
标准液的处理：用试剂二将标准液稀释至200、100、50、25、12.5、6.25、0nmol/ml.
二、 测定步骤：
1、 分光光度计预热30min 以上，调节波长至400nm，蒸馏水调零。
样本测定（在EP 管中依次加入下列试剂）：试剂名称（ L）
测定管
对照管
标准管
试剂一
200
蒸馏水
200
试剂二
250
250
样本
50
50
迅速混匀，放入37℃准确水浴30min
标准液
500
试剂三
1000
1000
1000
充分混匀，400nm 处测定吸光值A，计算 A=A 测定-A 对照。每个测定管需设一个对照管。
三、 -GAL 活性计算：
根据标准管的吸光度（x）和浓度（y，nmol/ml）建立标准曲线，将△A带入标准曲线中，计算样品生成的产物量（nmol/ml）。
（1） 按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg 组织蛋白每小时产生1nmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
-GAL 活力(nmol/h /mg prot)=(y V 反总) (V 样 Cpr) T
=20 y Cpr
需要另外测定，建议使用本公司BCA 蛋白质含量测定试剂盒。
（2） 按样本鲜重计算：
单位的定义：每g 组织每小时产生1nmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
-GAL 活力(nmol/h /g 鲜重)＝(y V 反总) (W V 样 V 样总) T
=20 y W
（3） 按细菌或细胞密度计算：
单位的定义：每1 万个细菌或细胞每小时产生1nmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
-GAL 活力(nmol/h /104 cell)= (y V 反总) (500 V 样 V 样总) T
=0.04 y
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；V 反总：反应体系总体积，0.5mL；V 样：加入反应体系中样本体积，0.05mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；W：样本质量，g； 500：细胞或细菌总数，500 万；T：反应时间，0.5h。
-半乳糖苷酶（ -GAL）测试盒 可见分光光度法订购说明：
1、绝大部分产品备有现货，一般情况下都能订货当日发货。
2、部分非常用产品，需提前1－2日预订，海外期货则需要提前3-6周预订。
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化，若有变动以订货当日新价格为准。
4、每日订单截止时间为16点整，部分城市可到17点整，因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
5、请办理完货款后，将收据、底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。
-半乳糖苷酶（ -GAL）测试盒 可见分光光度法运输说明：
1、极低温产品：极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来，再用泡沫盒密封，胶带层层粘住泡沫盒，放入索莱宝专用的箱子，然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送至客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
2、低温产品：低温产品运输过程中加装索莱宝专用冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来，再使用泡沫盒密封，用胶带严实密封泡沫盒，再放入索莱宝专用的箱子（保温效果少可以持续一周），然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送至客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
3、常温产品：常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货，准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。
