1)训练目的
了解细胞密度换算意义;掌握细胞密度换算方法。
2)实验原理
细胞密度换算实际上是根据溶液稀释公式,即溶液稀释前后溶质含量保持不变。
3 )买验材料
计算纸、笔、计算器、移液器、吸头、小试管。
4)操作步骤
(1)意义
在细胞培养实验设计中,常根据设计需求制备一定量、一定浓度的细胞悬液,就涉及问题。稀释错误将导致实验出现偏差。
(2)方法
实际上仍根据溶液稀释公式,即溶液稀释前后溶质含量保持不变。
c1 v1=c2 v2
式中c1、v1 溶液稀释前的浓度和体积;
c2、v2 溶液稀释后的浓度和体积。
例如:欲配制10 mL,106个/mL的细胞悬液,现有107个/mL的细胞悬液若干毫升,应如何稀释?
已知:c1=107/mL,c2=106/mL,v2=10 mL,求v1。根据上式得:
v1=c2 v2/c1=106x10/107=1 mL
即取107/mL的细胞悬液1 mL,不加9 mL培养液,即成10 mL、106/mL的细胞悬液。
(3)计算并配制
将原液作20倍稀释后,通过细胞计数,已知4个大方格的细胞数为140个,试计算原液中的细胞密度(细胞数/mL);欲配制每mL含20个细胞的细胞悬液共6.5 mL,应将原液如何稀释?
提示:原液中细胞密度(细胞数/mL)=(4大格细胞数之和/4) 104x20(原液稀释倍数)
(来源:舜冉(上海)生物科技有限公司)关注本网官方微信 随时阅读专业资讯