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工作原理是储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程, 各组分在移动速度上产生较大的差别, 被分离成单个组分依次从柱内流出, 通过检测器时, 样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。
高效液相色谱仪的仪器本身是记录样品通过检测器时，吸光度的变化而产生的电信号变化，从而产生色谱谱图。最终的结果就算要靠后期的色谱数据处理系统的数据处理。下面介绍一下两种常用的高效液相色谱仪的两种数据处理方法。
在谱图处理处理完谱图，即可制作校正曲线，校正曲线是数据处理的重点，是将标样谱图的信息与数据做成一个标准，供处理试样谱图使用。校正是通过分析指定的准备好的标准样品，来确定计算绝对组分浓度的响应因子的过程。
1、外标法：外标法是指添加一定量的标准品于空白样品中制成对照样品，与未知检测样品平行进行样品处理并检测，根据对照品响应值与标准品的浓度函数关系计算出未知检测样品中被测组分浓度的定量方法。
2、内标法：内标法指的是将一定重量的纯物质作为内标物加到一定量的被测样品混合物中，然后对含有内标物的样品进行色谱分析，分别测定内标物和待测组分的峰面积及相对校正因子，按公式计算出被测组分的含量。
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