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价格(元)
Taq DNA聚合酶(5U/ L)
D1010L1178
1000 U
-20 ℃
300产品描述
本制品是94kDa的耐热性DNA聚合酶，是把Thermus aquaticus DNA Polymerase基因在大肠杆菌中进行表达后经多次纯化分离而得到的。它与天然Taq DNA聚合酶具有相同的功能。使用本制品扩增得到的PCR产物的3 端附有一个"A"碱基，因此可直接克隆于T载体中。配以Life-iLab独特配方的5 反应缓冲液（已添加Mg2+）可获得更加理想的扩增结果。
D1010L1178 Taq DNA聚合酶(5U/ L)活性定义
在74℃条件下，30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。
D1010L1178 Taq DNA聚合酶(5U/ L)产品特点
高效：以入DNA为模板，扩增长度可达8kb，可以高效扩增 4kb片段。
灵敏：可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。
高品质：完全满足Real Time PCR的实验要求。
独特配方的5 Buffer：使PCR扩增反应更加稳定、灵敏、高效。
D1010L1178 Taq DNA聚合酶(5U/ L)产品用途
常规PCR鉴定；小片段目标基因克隆；平端PCR产物加A；双脱氧法测序；荧光定量PCR。
D1010L1178 Taq DNA聚合酶(5U/ L)使用建议
使用本试剂扩增得到的PCR产物3 端有一突出"A"碱基，可直接克隆于T载体中。如需扩增克隆较长片段建议换用Pfu DNA聚合酶。当扩增大片段时，Taq酶的扩增效率大大低于Taq Plus酶，在 4Kb片段的PCR扩增中建议换用Taq Plus酶。
实用实例：
例1: 50 L扩增体系中，以5ng DNA 为模板，对500bp～6.0kb
的扩增结果。
泳道M：1KB DNA Marker；
泳道1：0.5kb；泳道2：1.0kb；
泳道3：2.0kb；泳道4：3.0kb；
泳道5：4.0kb；泳道6：6.0kb；
例2: 50 L扩增体系中，分别以50ng～0.05ng人基因组DNA为模
板，可对特定基因片段（380bp）进行很好的扩增。
泳道1：50ng；泳道2：5ng；
泳道3：0.5ng；泳道4：0.05ng；
泳道M：DNA Ladder 2000 Marker
产品包装
组份
D1010L1177
D1010L1178
Taq DNA 聚合酶(5U/ L)
50 L
200 L
dNTPs混合液(各10mM)
200 L
1mL
5 Taq Buffer with Mg2+
2mL
10mL
运输和储存
-20℃运输和保存，避免反复冻融，在保存条件下可保存1年。
质量保证
经多次柱纯化，SDS-PAGE检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。
常用反应体系
常用PCR程序
5 x Taq Buffer
上游引物
下游引物
dNTPs(个10mM)
模板
Taq DNA聚合酶
ddH2O
10 L
0.2-1.0 M(终浓度)
0.2-1.0 M(终浓度)
1 L
1-50ng(质粒)/10ng-1 g(基因组)
0.25 L(1.25U)
至50 L
扩增片段 3k
扩增片段 3k
94℃ 90s
94℃ 20s
30次循环 57℃ 20s
72℃ 60s/kb
72℃ 5m
4℃ 保温
94℃
30次循环
72℃
4℃
20s
94℃ 5s
68℃ 60s/kb
5min
保温
注意事项使用方法
1、2mM Mg2+的终浓度可以满足绝大多数PCR扩增，对于某些PCR，为了保证较好的扩增，可调节为2-4mM。
2、体系中加入推荐的酶量，可以满足大多数PCR扩增，对于某些PCR，为了得到较好的扩增，可适当增加酶量。
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