EHA101感受态细胞_农杆菌感受态细胞-上海淳麦生物科技有限公司

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产品简介 品牌 自营品牌 规格 20只 供货周期 现货     上海淳麦生物科技有限公司在感受态细胞的研发方面，实力雄厚，拥有了克隆、表达、酵母和农杆菌4大类，共计百余种感受态细胞。在电击感受态方面，拥有了大肠杆菌 电转化感受态细胞和农杆菌电击感受态种类，极大提高了客户在转基因以及文库构建方面的成功率。
详细介绍 货号：CM-6057G供应商：上海淳麦数量：1000只英文名：T1Chemically Competent Cell保质期：1年保存条件：零下80度规格：20*100ul

EHA101农杆菌感受态细胞

EHA101 Chemically Competent Cell

产品编码： 保存条件： -80℃ 
产品规格:

EHA10120 100 lpK7WGF2 (control vector)10 ng/ l 10 l

 
EHA101农杆菌感受态细胞基因型：
C58 (rif R) Ti pEHA101 (pTiBo542 D T-DNA) (kanR, strepR) Nopaline
EHA101农杆菌感受态细胞简要说明：
 EHA101菌株为C58型背景，核基因中含有筛选标签 利福平抗性基因rif，为了便于转化操作，此菌株携带一无自身转运功能的胭脂碱型Ti质粒pEHA101 (pTiBo542DT-DNA)，此质粒含有vir基因 (vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件，pEHA101 (pTiBo542DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。
pEHA101 (pTiBo542DT-DNA) 型Ti质粒含有筛选标签：strep、kan，赋予EHA101菌株链霉素抗性和卡那霉素抗性，适用于玉米、水稻、烟草等植物的转基因操作，经pK7WGF2质粒检测转化效率可达104 cfu/ g DNA。

EHA101农杆菌感受态细胞操作说明：

 取-80℃保存的农杆菌感受态于冰上待其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰中。 每100 l 感受态加1 g（体积不大于10 l）质粒DNA，用手管底混匀，依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、28℃水浴5分钟、冰浴5分钟。 加入700 l无抗生素的LB或YEB液体培养基，于28℃，200rpm振荡培养2~3小时。

4. 6000 rpm离心一分钟收菌，留取100 l左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的LB或YEB平板上，倒置放于28℃培养箱培养2-3天。
EHA101农杆菌感受态细胞注意事项：

 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10；质粒不纯或存在乙醇等有机物污染，转化效率急剧下降；质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。 混入质粒时应轻柔操作，转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。 利福平浓度不应高于25  g/ml，过高的利福平浓度不利于农杆菌生长，会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有50  g/ml kan，若所用平板同时含有20  g/ml rif则转化效率降低到1/2。4. 培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌；根据所用菌株抗性加入链霉素或庆大霉素可防止Ti质粒丢失，但链霉素不利于农杆菌的转基因操作，所以一般培养农杆菌时不考虑链霉素或庆大霉素，Ti质粒丢失的概率极低 (可以忽略)。其他推荐： 其他推荐产品 更多
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