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蛋白质实验中一些试剂的名称和作用_91化工仪器网

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放大字体  缩小字体    发布日期:2019-09-02  来源:仪器信息网  作者:Mr liao  浏览次数:364
核心提示:1、三羟甲基氨基甲烷(Tris(hydroxymethyl)aminomethane,一般简称为Tris)一种有机化合物,其分子式为(HOCH2)3CNH2。Tris被广泛应用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备。例如,在生物化学实验中常用的TAE和TBE缓冲液(用于核酸的溶解)都需要用到Tris。由于它含有氨基,因此可以与醛发生缩合反应。两种溶液作用机制不同Triton X-100是一种非离子表面活性剂,有破膜作用Tris-HCl具有缓冲pH值作用,是一种碱性裂解液2、Triton X-100 (


1、 三羟甲基氨基甲烷(Tris(hydroxymethyl)aminomethane,一般简称为Tris)

一种有机化合物,其分子式为(HOCH2)3CNH2。Tris被广泛应用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备。例如,在生物化学实验中常用的TAE和TBE缓冲液(用于核酸的溶解)都需要用到Tris。由于它含有氨基,因此可以与醛发生缩合反应。
两种溶液作用机制不同
Triton X-100是一种非离子表面活性剂,有破膜作用
Tris-HCl具有缓冲pH值作用,是一种碱性裂解液

 2、 Triton X-100 (曲拉通 X-100)(磷酸缓冲液)

化学名称为聚乙二醇辛基苯基醚,是一种优异的表面活化剂,润湿及洗涤剂。在免疫组织化学(厚切片) 和免疫细胞化学中,Triton X-100 被用来做细胞破膜剂/细胞通透剂,即在细胞膜上打孔。这样抗体就能进入内与相关的抗原结合了。
Triton X100一般在阻断缓冲液中或稀释缓冲液中使用,基本不用做洗液。使用浓度0.2%。较厚的石蜡切片更应该应用Triton X100,这样可以获得更好的染色背景。
Tris-HCl提供一个一定pH值缓冲环境,它的作用根据其不同的PH有很多作用,可以被用作梯度洗脱液,封闭液,总而言之就是为了控制溶液的PH。

3、 水饱和酚与Tris饱和酚的作用与区别

(1)水饱和酚(Phenol Water)又叫水平衡酚。水饱和酚的PH小于7,一般是PH为5.0左右,通常与异硫氢酸胍一起使用,用于细胞RNA的提取,在酸性环境中,DNA在酚相,RNA在水相。两者就分开了。

 (2)Tris饱和酚(Tris-phenol)一般PH大于7.8,用于DNA的提取:
其中,酚是强的蛋白变性剂,可以使细胞或组织中的蛋白质变性析出。
而Tris的主要作用是防治止酚类氧化,若酚类氧化,则会形成醌(两个苯环),醌含有强自由基,会破坏核酸结构。 同时,由于PH值大于7,在碱性环境中DNA处于水相,RNA处于有机相。从而分离上清,即可得到DNA

4、 EDTA中文名称为乙二胺四乙酸,是的金属螯合剂,
我们常用的抗凝剂主要有两类,
一类是Ca钙离子螯合剂,如柠檬酸钠,柠檬酸钾,草酸钠等,
另一类是生物活性抗凝剂,如肝素等,
当血液中的钙离子被螯合剂结合后,血液因没有钙离子而无法凝结,如果EDTA能够抗凝的话,应该是遵循螯合钙离子,而使血液无法凝固
5、 Milli-Qwater
超纯水

特别适用AA、IC等的微量离子分析 
6、 乙酸铵的作用:沉淀蛋白质

7、二烷基硫酸钠;K12;AS;SDS;Sodium lauryl sulfate 
十二烷基硫酸钠又称K12、AS简称SDS,结构式CH3(CH2)11OSO3Na,分子量288.39。白色至微黄色粉末,微有特殊气体,表观密度0.25g/mL,熔点180~185℃(分解),易溶于水,HLB值为40.无毒。
用作丙烯酸酯乳液聚合的阴离子表面活性剂。贮存于阴凉、通风、干燥的库房内,防火、防水、防潮。


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