红细胞裂解液方法步骤_91化工仪器网

上海圻明生物红细胞裂解液现货供应。可直接与血液或脾细胞悬液混合，也可用于重悬离心收集的血细胞，其能够选择性裂解样品中的红细胞，而不破坏白细胞。通过低速离心的方法去除红细胞裂解碎片和血小板，收集白细胞，回收率可达90%以上。被富集的白细胞的生物学活性不受影响，可用于各种后续的细胞实验。当从得到的白细胞中提取DNA、RNA、和蛋白质时，可免除红细胞成分如血红素等的不利影响。适于裂解人全血、小鼠全血或脾细胞悬液中的红细胞。

规格：100 ml

与全血混合直接裂解红细胞:

1.采取0.35 ml人或小鼠全血，加入1.5 ml离心管

2.加1 ml红细胞裂解液，颠倒混合，室温放置10 min。

3. 1500g离心5分钟，弃上清。细胞沉淀应为白色。如果裂解不完全，可用1 ml裂解液重悬细胞沉淀，室温静置10 min。1500g离心5分钟，弃上清。

4. 用1.5 ml PBS缓冲液或生理盐水重悬细胞，1500g离心5分钟，弃上清。重复洗涤2次。

重悬细胞沉淀后裂解红细胞:

1.采取1 ml人全血或小鼠全血，枸橼酸钠或EDTA或肝素抗凝。或用1个小鼠脾脏制备的细胞悬液，1500g离心10分钟收集所有细胞。弃上清。

2.加3 ml 裂解液重悬细胞(约100~200万个细胞)。颠倒混合，室温放置10 min。

3.1500g离心5分钟，弃上清。细胞沉淀应为白色。如果裂解不完全，应重复步骤2-3

4.用1.5 ml PBS或生理盐水重悬细胞，1500g离心5分钟，弃上清。重复洗涤2次。

说明:

1.每3 ml裂解液可充分裂解约1 ml的全血中的红细胞，可按此比例扩大或缩小规模。加入过少的裂解液可能导致红细胞裂解不完全。

2.该裂解液裂解人和小鼠红细胞效果佳，裂解其他动物红细胞时效率略低但仍可裂解。

3.尽量使用4 C储存小于1周的血液。

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