在人癌胚抗原(HZA)检测试剂盒中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下倒置混和,不要在混匀器上强烈振荡。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清天然凝固、血块收缩后即可取得。也可在板孔中加入稀释液,再在其加入血清标本,然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存。可用作人癌胚抗原(HZA)检测试剂盒测定的标本十分广泛,体液(如血清 )、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体 或抗原成份,人癌胚抗原(HZA)检测试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保留。
已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);
(3)酶的底物;
(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);
(5)结合物及标本的稀释液;
(6)洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;
(7)酶反应终止液,常用的HRP反应终止液为硫酸,其浓度按加量及比色液的zui终体积而异,在板式ELISA中一般采用2mol/L。
假如您的人癌胚抗原(HZA)检测试剂盒不幸地碰到了高背景,那么也无需太担心,依次查看人癌胚抗原(HZA)检测试剂盒系统中的组分,并排除可能存在的题目。记住,非特异的抗体结合会增加背景。不外,它的缺点在于能与Protein A和IgG抗体相互作用。为了防止这一点,切勿使用过多的一抗或二抗。请勿使用高浓度(正常浓度为0.01-0.1%),它会降低特异结合,产生假阴性。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。目前主要有两种类型的封锁液:蛋白和非离子型去污剂。您当然也希望抗体只与目的蛋白结合吧。假如您一直被背景题目所困扰,那么也许您该花些时间来优化封锁液。
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