BC0200-过氧化氢酶（CAT）检测试剂盒 分光光度法_抗逆系列-北京索莱宝科技有限公司

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过氧化氢酶（CAT）检测试剂盒 分光光度法
CAT（EC 1.11.1.6）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是Z主要的 H 2 O 2 清除酶，在活性氧清除系统中具有重要作用。H2O2在 240nm下有特征吸收峰，CAT 能够分解 H2O2，使反应溶液 240nm 下的吸光度随反应时间而下降，根据吸光度的变化率可计算出 CAT 活性。 【详细说明】

过氧化氢酶(CAT)检测试剂盒 分光光度法

产品简介 ：
    CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是主要的 H 2 O 2 清除酶，在活性氧清除系统中具有重要作用。
    H2O2在 240nm下有特征吸收峰，CAT 能够分解 H2O2，使反应溶液 240nm 下的吸光度随反应时间而下降，根据吸光度的变化率可计算出 CAT 活性。

试验中所需的仪器和试剂：
紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水

产品内容 ：
提取液：60mL 1 瓶，4℃保存；
试剂一：60mL 1 瓶，4℃保存；
试剂二：100 uL 3 瓶，4℃保存。

操作步骤 ：
一 、 粗酶液提取 ：
1、细菌、细胞或组织样品的制备
    收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每 200 万细菌或细胞加入 400 L 提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率 20%，超声 3 秒，间隔 10 秒。重复 30 次）；8000g 4℃离心 10 分钟，取上清，置冰上待测。
    称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10 分钟，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。

二 、CAT  测定操作
    1、CAT 检测工作液的配制：用时在每瓶试剂二（100 uL）中加入 20mL 试剂一，充分混匀，作为工作液。
    2、测定前将 CAT 检测工作液 37℃（哺乳动物）或 25℃（其他物种）水浴 10min。
    3、取 1mLCAT 检测工作液于 1mL 石英比色皿中，再加入 35 L 粗酶液，混匀；室温下立即测定 240nm 下的初始吸光值 A1 和 1min 后的吸光值 A2。计算 ?A=A1-A2

三 、CAT  活性计算 ：
1、血清（浆）CAT 活力的计算:
    单位的定义：每升血清（浆）在反应体系中每分钟催化 1umol H 2 O 2 降解定义为一个酶活力单位。
    CAT（U/L）＝反应总体积（1035ul） 样本体积（35ul） 反应时间（1min） H 2 O 2 消光系数（43.6 10 -3 ） ?A=678 ?A
2、组织 CAT 活力计算：
（1）按样本蛋白浓度计算：
    单位的定义：每 mg 组织蛋白在反应体系中每分钟催化 1nmol H 2 O 2 降解定义为一个酶活力单位。
    CAT（U/mg prot）＝反应总体积（1035ul） 样本体积（35ul） 反应时间（1min） H 2 O 2 消光系数（43.6 10 -3 ） ?A 蛋白质浓度（mg/mL）=678 ?A 蛋白质浓度（mg/mL）
（2）按样本鲜重计算：
    单位的定义：每 g 组织在反应体系中每分钟催化 1nmol H 2 O 2 降解定义为一个酶活力单位。
    CAT （U/g mass） ＝反应总体积 （1035ul） 样本体积 （35ul） 反应时间 （1min） H 2 O 2 消光系数 （43.6 10 -3 ） A 样本鲜重（g/mL）=678 ?A 样本鲜重（g/mL）
3、细菌或细胞中 CAT 活力计算：
（1）按样本蛋白浓度计算：
    单位的定义：每 mg 组织蛋白在反应体系中每分钟催化 1nmol H 2 O 2 降解定义为一个酶活力单位。
    CAT（U/mg prot）＝反应总体积（1035ul） 样本体积（35ul） 反应时间（1min） H 2 O 2 消光系数（43.6 10 -3 ） ?A 蛋白质浓度（mg/mL）=678 ?A 蛋白质浓度（mg/mL）
3.2 按细菌或细胞密度计算：
   单位的定义：每 1 万个细菌或细胞在反应体系中每分钟催化 1nmol H 2 O 2 降解定义为一个酶活力单位。
   CAT（U/10 4 cell）＝反应总体积（1035ul） 样本体积（35ul） 反应时间（1min） H 2 O 2 消光系数
   （43.6 10 -3 ） ?A 细胞密度（10 4 cell /mL）=678 ?A 细胞密度（10 4 cell /mL）

 

过氧化氢酶(CAT)检测试剂盒 分光光度法订购说明：

1、绝大部分产品备有现货，一般情况下都能订货当日发货。 
2、部分非常用产品，需提前1－2日预订，海外期货则需要提前3-6周预订。 
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化，若有变动以订货当日新价格为准。 
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5、请办理完货款后，将底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。

过氧化氢酶(CAT)检测试剂盒 分光光度法运输说明：

1、极低温产品：极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来，再用泡沫盒密封，胶带层层粘住泡沫盒，放入索莱宝专用的箱子，然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送至客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
2、低温产品：低温产品运输过程中加装索莱宝专用冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来，再使用泡沫盒密封，用胶带严实密封泡沫盒，再放入索莱宝专用的箱子（保温效果少可以持续一周），然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送至客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
3、常温产品：常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货，准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。

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