检测高密度脂蛋白对于血清和组织样本的处理方法汇总-技术文章-上海信帆生物科技有限公司

检测高密度脂蛋白对于血清和组织样本的处理方法汇总​！

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 样本处理:

血清(浆)：直接测定，如超过线性范围用生理盐水稀释后测定。  #9313;、培养液样本：吸取培养液，1000 转/分，离心 10 分钟，取上清测定。

 [注]：一般建议细胞密度在 100万个/ml以上。  #9314;、组织样本：准确称取组织重量,按重量(g)：体积(ml)=1：9 的比例，加入 9 倍体积的匀浆介 质，冰水浴条件下机械匀浆，2500 转/分，离心 10 分钟，取上清液待测。

 [注]:1、如组织样本为非高脂样本，匀浆介质统一用磷酸盐缓冲液(0.1mol/L pH 7.4)或生理盐水进行提取。

检测高密度脂蛋白对于血清和组织样本的处理方法汇总​！

 2、如组织样本为高脂样本或部分为高脂样本，匀浆介质可统一用无水乙醇进行提取。 

细胞样本： A、细胞收集:将制备好的细胞悬液取出，1000 转/分，离心 10 分钟，弃上清液，留细胞沉 淀；用等渗缓冲液（推荐0.1mol/L 、pH7～7.4 磷酸盐缓冲液）清洗1～2 次，同样1000 转/分，离心10 分钟，弃上清液，留细胞沉淀；

 B、细胞破碎:加入 0.2～0.3ml 的匀浆介质（推荐 0.1mol/L、pH7～7.4磷酸盐缓冲液或生理 盐水）进行匀浆，冰水浴条件下超声破碎(功率：300W，3～5 秒/次，间隔 30 秒，重复 3～5 次)或手动匀浆，制备好的匀浆液不离心直接测定。也可采用裂解液裂解(推荐 TritonX-100，1～2%，裂解 30～40分钟)，裂解好的液体不离心直接测定。 

[注]：一般建议细胞密度在 100万个/ml以上。破碎好的液体可显微镜观察细胞是否破碎完全 

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