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kaneka Protein A和Protein G对比-技术文章-上海起发实验试剂有限公司

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放大字体  缩小字体    发布日期:2019-09-02  来源:仪器信息网  作者:Mr liao  浏览次数:774
核心提示:上海起发实验试剂有限公司 地址:上海浦东川沙镇川沙路6619号上海起发实验试剂有限公司 邮编:201203 联系人:杨经理 电话:021-50724187 021-50724961传真:021-50724961手机:15921799099留言:发送留言个性化:www.qfbio.com 网址:www.qfbio.com 商铺:http://www.chem17.com/st178406/ Protein G是一种分离自G Streptococci的细胞壁蛋白,它可通过其Fc片段结合哺乳动物IgG。重组
上海起发实验试剂有限公司 地址:上海浦东川沙镇川沙路6619号上海起发实验试剂有限公司
邮编:201203
联系人:杨经理
电话:021-50724187 021-50724961
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留言:发送留言
个性化:www.qfbio.com
网址:www.qfbio.com
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Protein G是一种分离自G Streptococci的细胞壁蛋白,它可通过其Fc片段结合哺乳动物IgG。

重组protein G含有高亲和结合位点,减少了非特异性吸附。

Protein G和Protein A有不同的lgG结合特性,相比Protein A, Protein G对牛、羊、马等多克隆抗体有更强的结合力,

它还可以结合不能与Protein A很好结合的大鼠lgG、人lgG3和小鼠lgG1,具体结合能力见表2。

 

Protein A和Protein G对不同抗体的结合能力

种属

亚型

Protein A 结合力

Protein G 结合力

Human

IgA

varible

IgD

IgE

IgG1

++++

++++

IgG2

++++

++++

IgG3

++++

IgG4

++++

++++

IgGM

varible

Avian egg yolk

IgY

Cow

 

++

++++

Dog

 

++

+

Goat

 

++

Guinea pig

IgG1

++++

++

IgG2

++++

++

Hamster

 

+

++

Horse

 

++

++++

Koala

 

+

Liama

 

+

Monkey(rhesus)

 

++++

++++

Mouse

IgG1

+

++++

IgG2a

++++

++++

IgG2b

+++

+++

IgG3

++

+++

IgM

variable

Pig

 

+++

+++

Rabbit

no distinction

++++

+++

Rat

IgG1

+

IgG2a

++++

IgG2b

++

IgG3

+

++

Sheep

 

+/-

++

 

++++=结合能力强; ++=结合能力中等; =结合能力弱或没有结合

 

问题及解决方案

 

问题

原因分析

推荐解决方案

柱子反压过高 

筛板被堵塞

清洗或更换筛板

填料被堵塞

按照第3部分进行树脂清洗

裂解液中含有微小的固体颗粒,建议上柱前使用滤膜 (0.22或0.45 m) 过滤,或者离心去除。

样品流速过低

样品或缓冲液中有气泡

去除样品或柱子中的气泡

样品和缓冲液进行脱气

洗脱组分中没有目的蛋白

样品中抗体浓度太低

使用其抗原做配体的介质

抗体被降解

适当的提高洗脱pH;

将样品脱盐或透析到合适的Buffer中

样品与Protein G结合能力较弱

更换介质,如rProtein A Beads进行纯化

回收率逐渐减低

上样量太多

减少上样量

柱子太脏,载量降低

按照第3部分进行树脂CIP清洗

 

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