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支付方式:支付宝 | 网上银行更新时间:2018.10.121067
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猪蓝耳病毒天津株TJM-F92疫苗荧光PCR试剂盒针对猪蓝耳病毒天津株基因高度保守区基因序列设计特异性引物和荧光探针。在反应体系中含猪蓝耳病毒天津株基因组模板的情况下,PCR反应得以进行并释放 荧光信号。利用荧光定量PCR仪对PCR过程中相应通道的信号强度进行实时监测和输出,实现检测结果的定性、定量分析。
猪蓝耳病毒天津株TJM-F92疫苗荧光PCR试剂盒说明书
【产品名称】
通用名称:猪蓝耳病毒天津株(TJM-F92)核酸扩增检测试剂盒(PCR 荧光探针法)
Name :Nucleic acid amplification kit for detection of swine blue ear virus Tianjin strain (TJM-F92) (PCR fluorescence probe method)
【包装规格】48T/盒
【预期用途】
本试剂盒适用于检测全血等样本中的猪蓝耳病毒天津株,用于猪蓝耳病毒天津株感染的辅助诊断,其检测结果仅供参考。
【检验原理】
本试剂盒用一对猪蓝耳病毒天津株特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光 PCR 技术对猪蓝耳病毒天津株的核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
【试剂组成】
名 称 规 格
核酸提取液 1.5ml 2 管
酶液 50 l 1 管
YP 反应液 1.0ml 1 管
YP 阳性质控品 50 l 1 管
阴性质控品 250 l 1 管
说明:不同批号的试剂盒组分不可交互使用。
【储存条件和有效期】
试剂盒保存于-20 5℃,有效期 12 个月;
避免反复冻融,冻融次数不超过 5 次;试剂开瓶后,在室温条件下放置时间不
应超过 8 小时;运输采用干冰(或者冰袋)保持低温,运输时间不应超过 4 天。试
剂盒生产日期见产品标签。
【适用仪器】
ABI 7300、7500、ABI stepone / stepone plus 、安捷伦 MX3000P/3005P、MJ
Opticon2 等其他荧光定量 PCR 检测仪。
【标本要求】
标本采集:用注射器取血 5mL 至 EDTA-2Na 抗凝管
保存运输:上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过
6 个月,标本运送应采用 2~8℃冰袋运输,严禁反复冻融。
【使用方法】
1. 样品处理(样本处理区)
1.1样本前处理
取抗凝血下层血细胞 50uL,加入 100uL 双蒸水吹匀
1.2DNA 提取
1) 对上述处理好的标本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50uL核酸提取液),
100℃恒温处理 10 分钟,13,000 rpm 离心 5 分钟,取上清液转移至新的 1.5ml
EP 管,-20℃保存;
2) DNA 的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生产的 DNA 提取试剂
盒(离心柱提取法),请严格按照试剂盒说明书进行操作。
2. 试剂配制(试剂准备区)
根据待检测样本总数,设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性
对照+1 管阳性对照;样品每满 7 份,多配制 1 份),每测试反应体系配制如下表:
试剂 YP 反应液 酶液
用量(样本数为 N) 20 l 1 l
3. 加样(样本处理区)
将步骤 1 提取的 DNA、阳性质控品、阴性质控品各取 4 l,分别加入相应的反
应管中,盖好管盖,混匀,短暂离心。
4. PCR 扩增(核酸扩增区)
4.1 将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内;
4.2 设置好通道、样品信息,反应体系设置为 25ul;
荧光通道选择: 检测通道(Reporter Dye)FAM, 淬灭通道(Quencher Dye)
NONE,请勿选择 ROX 参比荧光。
4.3 推荐循环参数设置:
步骤 循环数 温度 时间 收集荧光信号
1 1 cycle 95℃ 10min 否
2 40 cycle
94℃ 15sec 否
55℃ 30sec 是
5. 结果分析判定
5.1结果分析条件设定
设置 baseline 和 Threshold:一般直接按机器自动分析的结果分析,当曲线出
现整体倾斜时,根据分析后图像调节 baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范围
内调节)、stop 值(一般可在 5~20 范围内调节),以及 Threshold 的 Value 值(上
下拖动阈值线至高于阴性对照),重新分析结果。
5.2结果判断
阳性:检测通道 Ct 值 35.0,且曲线有明显的指数增长曲线;
可疑:检测通道 35.0 Ct 值 37,建议重复检测,如果检测通道仍为 35.0 Ct
值 37,且曲线有明显的增长曲线,判定为阳性,否则为阴性;
阴性:样本检测结果 Ct 值 37 或无 Ct 值。
7. 质控标准
阴性质控品:无明显扩增曲线或无 Ct 值显示;
阳性质控品:扩增曲线有明显指数生长期,且 Ct 值 32;
以上条件应同时满足,否则实验视为无效。
8. 产品性能指标
阴阳性参考品符合率:8 份阳性参考品符合率为 100%;10 份阴性参考品符合
率为 100%。
最低检测限:2.0 102copies/ml。
精密度:批内、批间精密度检测 Ct 值的变异系数(CV)均 3%。
公司优势:
1)质量:我司提供的的试剂为世界知名品牌
2)价格:价格实惠,量大从优。
4)服务:提供完整的售前、售后和售中服务。售后到底
如需订购猪蓝耳病毒天津株TJM-F92疫苗荧光PCR试剂盒,请联系我们。
此外公司还提供:
0512猪多杀性巴氏杆菌(SPA)核酸检测试剂盒(PCR法)48T0412丹毒杆菌(SER)核酸检测试剂盒(PCR法)48T0312猪细小病毒(PPV)核酸检测试剂盒(PCR法)48T0222猪圆环病毒2型(PCV-2)核酸检测试剂盒(PCR法)48T0212猪圆环病毒通用型(PCV-U)核酸检测试剂盒(PCR法)48T0122伪狂犬病毒野毒株(PRV-gE)核酸检测试剂盒(PCR法)48T0112伪狂犬病毒(PRV-gC)核酸检测试剂盒(PCR法)48T0271口蹄疫O型/A型/Asia1型(FMDV-O/-A/-Asi48T以上信息由企业自行提供,信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责,91化工仪器网对此不承担任何保证责任。
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