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天狼猩红(Sirius Red)染色-91化工仪器网

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放大字体  缩小字体    发布日期:2019-09-02  来源:仪器信息网  作者:Mr liao  浏览次数:853
核心提示:北京嘉美臻元生物技术有限公司(嘉美实验)是一家专注于生命科学领域的高科技企业,公司创立于2005年,由在国内科研试剂、实验技术、质量管理领域有着十几年从业经验的专业、专家团队组建而成;2009年在北京重组,先后成立了北京嘉美诺斯生物科技有限公司(主要开展生物相关产品进、出口业务),北京嘉美纽诺生物科技有限公司(主要为大型药厂、诊断试剂公司提供服务)。为方便实验服务项目开展,成立了北京嘉美臻元生物技术有限公司,以 嘉美实验 品牌提供实验外包服务。近五年来,公司已为全国各类科研用户提供了近5000个大大小小的

北京嘉美臻元生物技术有限公司(嘉美实验)是一家专注于生命科学领域的高科技企业,公司创立于2005年,由在国内科研试剂、实验技术、质量管理领域有着十几年从业经验的专业、专家团队组建而成;2009年在北京重组,先后成立了北京嘉美诺斯生物科技有限公司(主要开展生物相关产品进、出口业务),北京嘉美纽诺生物科技有限公司(主要为大型药厂、诊断试剂公司提供服务)。为方便实验服务项目开展,成立了北京嘉美臻元生物技术有限公司,以 嘉美实验 品牌提供实验外包服务。近五年来,公司已为全国各类科研用户提供了近5000个大大小小的专项实验外包或整体课题外包项目服务,实验项目涵盖了生命科学、医学的各研究领域。经过多年努力,公司已成为北京地区Maximum、Most professional、Most efficient的生物实验外包服务平台。已成功为协和医院、liberation army总医院等全国数百家医院提供了优质的实验外包服务。

嘉美实验面对医学院及其附属医院、医药科研院所、大学生命科学院、中科院、药企等类型单位提供单项和整体课题实验外包服务。对于科研任务繁重但工作繁忙而无暇分身的临床医生而言,我们的实验外包服务尤为需要,只需要实验委托者将课题交付我们,剩下的工作由嘉美实验完成,这为实验委托者节约了大量宝贵的时间和精力,提高了生活品质。对于面临毕业的广大硕士、博士而言,我们乐于一起探讨课题方案的合理性并给出建议,Maximum degree上优化实验方案和节约资金。对于课题也许您还只是个设想,嘉美生物却能将您的设想变为一个个成功的实验硕果。

嘉美实验所追求的目标不仅仅是一个科研课题实施的过程;我们更多的是关注实验前后的每个环节,真正成为实验委托者在医学和生命科学研究路上的良师益友。 专注生物技术,服务生命科学 ,为您构筑医学和生命科学研究的一座座丰碑!

服务特点
结果可靠:行业老牌企业,11年技术服务经验沉淀,质量全程管控,实验结果可靠。
数据规范:326家医院,68所高校,近5000个项目的积累,严格遵循行业学术标准。
服务高效:线上线下7X24小时,多渠道响应咨询及服务需求,确保沟通及时、畅通。
配套齐全:从课题设计、试剂购买、实验开展、SCI论文发表,可提供一站式配套服务。
管理精细:公司以客户需求为中心,管理流程规范、保密机制严格,成本控制有效。

服务流程
1、提供项目方案:客户根据课题标书及需做实验的主体内容,拟定并提供初步的项目方案,含课题申请书,实验方案,实验设计,实验思路,实验文献等与实验相关等内容和资料;
2、项目评估报价:公司技术团队根据客户提供的相关资料,综合评估项目可行性,与客户共同确定准确的实验项目执行方案,给出准确的实验价格;
3、签订服务协议:签署服务协议并预付部分费用,做好实验初步准备及项目预安排;
4、执行服务项目:正式启动实验进程,全面展开实验,确保项目有效执行;
5、沟通项目进展:及时沟通反馈实验的Newest进展,随时了解掌控实验的Newest动态;
6、完成项目交付:支付剩余尾款,交付实验结果,正确应用实验结果,提供售后服务。


天狼猩红(Sirius Red)染色


一、天狼猩红(Sirius Red)染色简介
利用胶原蛋白聚合及其缠绕螺旋排列不同的特点,使用天狼星红苦味酸染色法,在偏振光显微镜下,可以根据双折光性和着色的不同,分别显示出四型(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)胶原纤维。区分并定量这四种胶原纤维,对于研究病变的发生机理和演变过程有一定的意义。

二、试剂配制

1、天狼星红-饱和苦味酸液:0.5%天狼星红10ml,苦味酸饱和水溶液90ml。

2、天青石蓝液:天青石蓝B 1.25g,铁明矾1.25g,蒸馏水250ml。溶解煮沸,冷却后过滤,加入甘油30ml,然后再加入浓硫酸0.5ml(硫酸一定要后加入)。


三、染色步骤

1、石蜡切片脱蜡至水。

2、天青石蓝液5~10min

3、蒸馏水冲洗3次

4、天狼星红饱和苦味酸液15~30min(可用Harris苏木素液淡染细胞核)

5、无水乙醇分化与脱水。

6、 二甲苯透明、光学树胶封固

7、结果:

 1)普通光镜观察:胶原纤维呈红色,细胞核呈绿色,其他成分呈黄色。

  2)偏振光显微镜下观察:

  3)Ⅰ型胶原纤维:红色或黄色,排列紧密,具强双折光性

  4)Ⅱ型胶原纤维:多种色彩,疏松网状、弱双折光性

  5)Ⅲ型胶原纤维:绿色、细纤维、弱双折光性

  6、Ⅳ型胶原纤维:淡黄色、弱双折光性(基膜成分)

四、样本说明

1、石蜡切片

取材:1、组织离体后需及时固定;2、组织标本不宜过大、过厚。

固定:1、固定液:10%福尔马林(4%多聚甲醛)或10%中性甲醛;2、用量:一般固定液的量与组织体积比为10:1~20:1;3、固定:适宜的固定时间,主要根据材料的大小、松密程度及固定液的穿透速度而定。

保存:切片经60℃烤片3-5小时后,可于常温或4℃干燥保存。
 

2、冰冻切片

取材:取材后需立即置于超低温冰箱或液氮中保存。

固定:样本冰冻切片后,应立即放入甲醇、丙酮、95%酒精、4%多聚甲醛等固定液中固定。

保存:固定好的切片自然风干,密封后置于-80℃、-20℃保存,尽快用于后续实验。
 

3、细胞块石蜡切片

细胞量较多的样品,可离心分离所需细胞,用中性甲醛固定后制作成琼脂细胞块,然后按照制作石蜡切片的操作流程进行切片。
 

4、细胞爬片

在孔板里做的细胞爬片,爬片取出后,用PBS洗涤2次(根据研究目的,PBS洗涤可选择不做),用4%多聚甲醛4℃固定15分钟,将表面液体吹干,置于-20℃保存。若在短时间内即开展实验,可在加固定液后,于4℃冰箱中放置一段时间。
 

5、细胞涂片

细胞涂片常用的固定液有95%酒精(最为常用)、酒精-冰醋酸液、Ethyl ether-酒精液和Carney s液等。 

 

五、免疫组化实验注意事项

1、常用的固定液为中性甲醛和4%多聚甲醛,能使大多数抗原保存良好,适用于免疫组织化学。

2、病理实验切片Best是防脱片,以免实验过程中出现掉片。若客户提供切片,应告知切片有无防脱处理。

3、骨组织、皮肤组织或脂肪含量较高的样本,实验过程中有较高的掉片几率。

4、客户可提供组织块(以10%福尔马林、4%多聚甲醛或10%中性甲醛固定,如组织块极小请事先说明)、蜡块或切片(使用免疫组化专用切片,以避免实验过程中掉片)

5、待检测蛋白的种属、实验分组情况及实验背景资料、其他具体要求等需事先说明。

6、若客户提供骨组织或钙化程度较高的组织进行实验,需进行脱钙处理。

7、浸泡在固定液中的组织样本,在运输中容器需密封,防止破碎、渗漏。

 
 
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