原代细胞当经荧光染色或标记的单细胞悬液放入样品管中,被高压压入流动室内。流动室内充满鞘液,在鞘液的包裹和推动下,细胞被排成单列,以一定速度从流动室喷口喷出。在流动室的喷口上配有一个超高频的压电晶体,充电后振动,使喷出的液流断裂为均匀的液滴,待测细胞就分散在这些液滴之中。将这些液滴充以正、负不同的电荷,当液滴流经过带有几千伏的偏转板时,在高压电场的作用下偏转,落入各自的收集容器中,没有充电的液滴落入中间的废液容器,从而实现细胞的分离。
流式细胞分选的特点
1. 少量细胞分选时,流式细胞分选度高(99%以上),速度快。目前,先进的流式细胞仪的分选速度可达25 000个细胞/秒以上,比传统的分选速度提高了很多倍,原来需要一天的工作现在只需要几小时就能完成。不过流式细胞仪分离细胞的量还是有一定的限制,一次分离的zui大合理量约为108个细胞。如果细胞量超过109个,则需要耗费10小时以上,分选后细胞的活力会受到很大的影响。
2. 可以同时进行多个Marker分选,正选负选同时进行。以前的流式细胞仪只能给液滴充上正电荷或负电荷,因此在电场中只能向左或向右偏转,即两路分选。现在的仪器可以给液滴充以不同的电量,从而调整液滴的偏转角度,实现多路分选。BD的FACSAria流式细胞仪就可以进行四路分选。
3. 不仅于表面抗原,流式细胞仪可以根据任何能检测到的发光度(如细胞体积)或荧光(如DNA、RNA或蛋白含量,酶活性,特异抗原)散射度差异来分离细胞。如果能保证流式细胞仪的无菌状态,那么分选后的细胞还可以进行培养或其他分析。
4. 如果原代细胞只是偶尔做几次细胞分选的话,用流式分选还是比较划算的,只需要准备样品和抗体,交纳一定的仪器使用费即可,不需要购买配套的设备。
60-32-2 Aminocaproic Acid 氨基己酸标准品 200mg
125-84-8 Aminoglutethimide 氨鲁米特标准品 200mg
61-78-9 Aminohippuric Acid 氨马尿酸标准品 200mg
19774-82-4 Amiodarone Hydrochloride 盐酸胺碘酮标准品 200mg
33089-61-1 Amitraz 双甲眯标准品 200mg
549-18-8 Amitriptyline Hydrochloride 盐酸阿米替林标准品 200mg
12125-02-9 Ammonium Chloride 氯化铵标准品 200mg
57-43-2 Amobarbital CII 异戊巴比妥CII标准品 200mg
14028-44-5 Amoxapine 阿莫沙平标准品 200mg
原代细胞
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