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色谱分离是利用混合物中各组分在两相中分配系数不同，当流动相推动样品中的组分通过固定相时，在两相中进行的连续多次反复的分配，从而形成差速移动，达到分离目的的方法。
色谱分离技术是基于不同物质在由固定相和流动相构成的体系中具有不同的分配系数，在采用流动相洗脱过程中呈现不同保留时间，从而实现分离。传统色谱分离技术采用固定的色谱塔进行，先进入一定量物料，然后采用洗脱剂不断洗脱，在同一出口在不同时间段就可接到不同的产品组分，此过程费时费力。经过分析并加以改进，把固定相的树脂做成可以连续流动的系统，利用物质与固定相的相对运动速度不同实现分离。把固定相比成一个传送带，分别比成快慢不同的两组份，只要使固定相加上一个与洗脱方向相反的驱动力，使传送带运动速度处于速度中间，跑的快的比固定相快。从前头得到，跑得慢的被传送带带到后面得到。
色谱法简单分为气相色谱法、液相色谱法、超临界流体色谱法。根据气相和液相制备的不同，再分为填充柱色谱法、毛细管色谱法、经典液相色谱柱法、高效液相色谱法、薄层色谱法、紫色普法、毛细管电泳法。无论怎么分类，都有共同的特点：凡是色谱分离都具有固定相和流动相；固定相是不动的，流动相相对于固定相做相对运动；被分离的组分与流动相和固定相都有不同的作用力。这种作用力有吸附力、溶解力、离子交换能力等。
根据分离原理还可将色谱法分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、凝胶色谱、亲和色谱、电泳色谱、气相色谱等。利用物质吸附能力不同进行分离的称为吸附色谱，常用的吸附剂有硅胶、氧化铝、聚酰胺、活性炭、大孔吸附树脂等。利用物质在两相不互溶的溶剂中的分配比不同进行分离的称为分配色谱，常用的支持剂有硅胶、硅藻土、纤维粉等。液滴逆流色谱和高速逆流色谱则是在分配色谱与逆流分溶相结合的基础上发展而成的一种新技术。利用物质解离程度不同进行分离的称为离子交换色谱，常用的离子交换树脂有强酸型(磺酸型)、强碱型(季胺型)、弱酸型(羧酸型)、弱碱型(三级胺型)等。利用物质分子大小不同进行分离的称为凝胶色谱(亦称分子筛或排阻色谱)，常用的支持剂有葡聚糖凝胶、羟丙基葡聚糖凝胶等。利用电流通过时，离子趋电性不同进行分离的称为电泳色谱，常用的有纸电泳、琼脂电泳、凝胶电泳等。
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