糠秕马拉色菌（糠秕孢子菌）保存_工业微生物菌种-上海谷研实业有限公司

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资源名称:糠秕马拉色菌(糠秕孢子菌)保存 
种属:Malassezia furfur(Pityrosporum orbiculare)
安全等级   1
模式菌株   no
应用领域   生物医学研究
培养方法  
培养基   糠秕孢子菌培养基：麦芽汁琼脂 60.0 g，牛胆汁（干燥） 20.0 g，吐温40 10.0 g，Glycerol mono-oleate（单椰子油甘油酯） 2.5 g，蒸馏水 1.0 L。121℃，15min。
生长条件   28-30℃，好氧
糠秕马拉色菌(糠秕孢子菌)保存检测方法： 
1．将病人标本和/或液状对照品放至室温（15-30℃），轻轻混匀。测试前从包装袋中取出检测卡平放。
2．将1根Binax样本拭子浸入要测试的标本中，完全浸没拭子头。如果拭子有滴水，将拭子靠在收集容器的边上，排去多余的液体。
3．检测卡内部的右手边有两个孔，将拭子插入底部的孔中（拭子孔），稳步向前推，使整个拭子头在上部的孔中可见，不要取出拭子。
4．垂直持放A试剂瓶，高出检测卡上方1/2到1英寸，慢慢向底部的孔中加入3滴A试剂。
5．立即从检测卡的右缘揭去粘附衬，封闭检测卡，过15分钟在窗口判读结果。15分钟后读取的结果可能不准确。然而，有些阳性病人不到15分钟就出现可见样品线。
糠秕马拉色菌(糠秕孢子菌)保存注意事项：
1.  取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。
2.  冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜（DMSO）对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作 较大，因此，必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜（DMSO）zui好选择进口产品。
3.  离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。
4.  离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除 DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大， 死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜（DMSO），DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液 体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无有异常。
5.  细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml－15m培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。
6.  复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。甲灭草松分子式：分子量：C11H14N2O3S英文名称：MethylgroupCAS号：61592-45-8
(S)-3-甲酸甲酯盐酸盐英文名称：(S)-3-methylpiperidinehydrochlorideCAS号：分子式：165.61798分子量：C6H12ClNO2
2,5-二氯硝英文名称：2,5-twoCAS号：89-61-2分子式：192分子量：Cl2C6H3NO2
(S)-(+)-2-甲英文名称：(S)-(+)-2-methylpiperidineCAS号：3197-42-0分子式：99.17分子量：C6H13N
亚碘酰英文名称：Sub-iodineCAS号：536-80-1分子式：220.01分子量：C6H5IO
2,4-二巯-5,6-二嘧英文名称：2,4-two-5,6-twoCAS号：31295-41-7分子式：174.25分子量：C4H6N4S2
英文名称：CAS号：分子式：分子量：
3-异喹啉英文名称：3-aminogroupCAS号：25475-67-6分子式：144.17分子量：C9H8N2
2-乙并咪唑英文名称：2-ethylbenzimidazoleCAS号：1848-84-6分子式：146.19分子量：C9H10N2
(4-甲氧)三氟硼酸钾英文名称：(4-methoxyphenyl)threekbf4CAS号：192863-36-8分子式：214.04分子量：C7H7BF3KO
3-溴-9-咔唑英文名称：3-bromo-9-phenylcarbazoleCAS号：1153-85-1分子式：322.21分子量：C18H12BrN
二氯二茂钼英文名称：TwoCLtwoCAS号：12184-22-4分子式：297.03分子量：C10H10Cl2Mo10*
7.  加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题是DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响 细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是1％。所以如果你的冻存液的浓度是 10％DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。

PANC-1(人胰腺细胞)5 106cells/瓶 2gersion
MuM-2B(人眼脉络黑色素瘤细胞)5 106cells/瓶 2
MDBK(牛肾细胞)5 106cells/瓶 2gersion
糠秕马拉色菌(糠秕孢子菌)保存MDCK(犬肾细胞)5 106cells/瓶 2
HK-2(人肾小管上细胞)5 106cells/瓶 2
AAV-293(人胚肾细胞)5 106cells/瓶 2
CSC, 小鼠心肌细胞
小鼠膀胱平滑肌细胞完全培养基100mL
A549全细胞裂解液100 g100 g
鼠IgG-鼠IgG5 x 1ml国产