pnabio Cas9蛋白产品-技术文章-上海起发实验试剂有限公司

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PNA BIO INC致力于为基础研究和应用领域的实验室提供的研究产品和服务。

PNA Bio提供PNA（Peptide Nucleic Acid）产品，包括定制寡核苷酸，FISH探针，miRNA抑制剂，PNA钳夹探针和Fmoc单体。HPLC纯化后，它们与MS / MS数据一起提供 95％的纯度。PNA产品由Panagene制造。

PNA Bio还提供工程化核酸酶服务，包括CRISPR / Cas9核酸酶（RGEN）合成，验证和Cas9蛋白以及敲除和敲入细胞系服务。

Cas9 Protein with NLS 含有NLS的Cas9蛋白

Cas9蛋白与指导RNA复合，为CRISPR / Cas9技术提供了优于质粒或mRNA转染的益处。大的好处是，您可以制备准备在体内工作的RNP复合物。Cas9蛋白寿命短（细胞半衰期约为24小时），因此可以大限度地减少脱靶效应和镶嵌现象。您还可以通过简单的切割试验轻松测试体外指导RNA的活性。此外，Cas9蛋白非常稳定，与mRNA相比，活性确认更容易。后，它在更广泛的生物体中是活跃的，例如线虫，昆虫，植物和非典型的模型系统，因为它不需要转录或翻译。

由PNA Bio提供的Cas9蛋白与NLS缀合，并且它是注射/转染准备形式。

Cy3-Cas9可以很容易地富集用CRISPR / Cas9复合物转染的细胞。

体外切割测定

 

将PCR产物与不同量的Cas9蛋白一起温育并在凝胶上运行。体外切割测定是检查sgRNA活性的简单方法。

转染RNP复合物

 

通过电穿孔（Neon）或脂质转染胺（LF2000）将sgRNA和不同量Cas9蛋白的RNP复合物转染到NIH3T3细胞中。

注射RNP复合物

 

对于小鼠胚胎注射，将60ng / ul Cas9蛋白的RNP复合物和两种sgRNA各15ng / ul注射到小鼠胚胎中。从幼仔准备尾部DNA并进行T7E1测定.Grey代表WT，绿色代表大的缺失（＃2,3,4,8），红色代表小/ del（＃5,6,7），蓝色代表纯合子小/ in（＃9,10）。

 

 

Cas9蛋白

 来自化脓性链球菌的 Cas9蛋白与NLS

 注射，转染准备好

 通过体外切割测定，电穿孔（作为RNP复合物）和
每批次的小鼠胚胎注射验证活性

 标准浓度（CP01，重组至1 mg / ml）：20 ug，50 ug或200 ug（50 ug x 4）

 高浓度（CP02和CP03，重组至5 mg / ml）：250 ug（CP02）或1 mg（CP03,250 ug x 4）

 包装：CP01为20 ug或50 ug，CP02 / CP03为250 ug

 建议使用CP01进行显微注射，建议使用CP02 / CP03进行电穿孔

 也可用：D10A Nickase（CN01）和D10A / H840A dCas9（CD01）蛋白

 

液体形式的Cas9蛋白 

 可用1 mg / ml或5 mg / ml

 CP04-100：1mg / ml（6 M），20 g 5管

 CP04-500：5mg / ml（30 M），100 g 5管

 

Nickase和dCas9蛋白

 D10A Cas9 Nickase蛋白与来自化脓性链球菌的 NLS （CN01和CN02）

 D10A / H840A Cas9裂解死蛋白与来自化脓性链球菌的 NLS （CD01和CD02）

 以50 g大小提供，重构为1mg / ml（CN01 / CD01）或250 g大小，重构为5mg / ml（CN02 / CD02）。

 

 

Cy3-Cas9和Cy3-dCas9蛋白

 Cy3标记Cas9蛋白与NLS（CP06），以实现转染细胞的分选和可视化

 通过共聚焦显微镜检测荧光

 通过体外切割测定和细胞转染确认活性

 可提供浓度为5 mg / ml的50 ug（CP06-50）或200 ug（CP06-200）

 还可获得Cy3标记的dCas9蛋白（CD07）

 

 

 

通过电穿孔进入细胞，然后进行T7E1测定，证实Cy3-Cas9蛋白的活性。通过共聚焦显微镜确认荧光。

 

产品

描述

可用尺寸

CP01 
Cas9蛋白

含有NLS的Cas9蛋白（注射准备好）; 
重组至1 mg / ml（6 uM）

20微克（120 pmol / 6 uM x 20 ul）
50 ug（300 pmol / 6 uM x 50 ul）
200 ug（50 ug x 4 tube）

CP02 
高浓缩
Cas9蛋白

含有NLS的Cas9蛋白（注射准备好）; 
重组至5毫克/毫升（30微摩尔）;

250微克（1530 pmol / 30 uM x 50 ul）

CP03 
高浓缩
Cas9蛋白

含有NLS的Cas9蛋白（注射准备好）; 
重组至5毫克/毫升（30微摩尔）;

1毫克（250微克x 4）

CP04-100 
Cas9蛋白

含有NLS的Cas9蛋白（注射准备好）; 
液体形式，1毫克/毫升（6微摩尔）;

100微克（20微克x 5）

CP04-500 
高浓缩
Cas9蛋白

含有NLS的Cas9蛋白（注射准备好）; 
液体形式，5毫克/毫升（30微摩尔）;

500微克（100微克x 5）

CN01切口
酶蛋白

用NLS准备Cas9 D10A Nickase蛋白质; 重组至1 mg / ml（6 uM）

50微克

CN02切口
酶蛋白

用NLS准备Cas9 D10A Nickase蛋白质; 重组至5 mg / ml（30 uM）

250微克

CD01 
dCas9蛋白

含有NLS的Cas9 D10A / H840A蛋白; 
注射准备好，重组至1毫克/毫升（6微米）

50微克

CD02 
dCas9蛋白

含有NLS的Cas9 D10A / H840A蛋白; 
准备注射，重组至5 mg / ml（30 uM）

250微克

CP06 
Cy3-Cas9蛋白

Cy3标记的Cas9蛋白与NLS; 
5 mg / ml溶液（30 uM）

50微克
200微克

CD07 
Cy3-dCas9蛋白

Cy3标记的Cas9死蛋白与NLS; 
5 mg / ml溶液（30 uM）

50微克
200微克

 

 

Pnabio 部分产品列表

货号

品名

规格

品牌

CP01-20

Reconstitutes to 1 mg/ml, 120 pmol (6 uM x 20 ul)

20 ug

pnabio

CP01-50

Reconstitutes to 1 mg/ml, 300 pmol (6 uM x 50 ul)

50 ug

pnabio

CP01-200

Reconstitutes to 1 mg/ml, 1200 pmol (6 uM x 200 ul)

200 ug (50 ug x 4)

pnabio

CP02

Reconstitutes to 5 mg/ml, 1530 pmol (30 uM x 50 ul)

250 ug

pnabio

CP03

Reconstitutes to 5 mg/ml, 6000 pmol (30 uM x 50 ul x 4 tubes)

1 mg (250 ug x 4)

pnabio

CP04-100

Liquid form 1 mg/ml, 600 pmol (6 uM x 20 ul x 5 tubes)

100 ug (20 ug x 5)

pnabio

CP04-500

Liquid form 5 mg/ml, 3000 pmol (30 uM x 20 ul x 5 tubes)

500 ug (100 ug x 5)

pnabio

CN01

Reconstitutes to 1 mg/ml, 300 pmol (6 uM x 50 ul)

50 ug

pnabio

CN02

Reconstitutes to 5 mg/ml,1530 pmol (30 uM x 50 ul)

250 ug

pnabio

CD01

Reconstitutes to 1 mg/ml,  300 pmol (6 uM x 50 ul)

50 ug

pnabio

CD02

Reconstitutes to 5 mg/ml,1530 pmol (30 uM x 50 ul)

250 ug

pnabio

F1001

C-rich telomere probe, FAM labeled

5 nmole

pnabio

F1002

C-rich telomere probe, Cy3 labeled

5 nmole

pnabio

F1003

C-rich telomere probe,  Cy5 labeled

5 nmole

pnabio

F1004

C-rich telomere probe, Alexa Fluor 488 labeled

5 nmole

pnabio

F1005

G-rich telomere probe, FAM labeled

5 nmole

pnabio

F1006

G-rich telomere probe, Cy3 labeled

5 nmole

pnabio

F1007

G-rich telomere probe, Cy5 labeled

5 nmole

pnabio

F1008

G-rich telomere probe, Alexa Fluor 488 labeled

5 nmole

pnabio

F1009

C-rich telomere probe, FITC labeled

5 nmole

pnabio

F1010

G-rich telomere probe, FITC labeled

5 nmole

pnabio

F1013

 C-rich telomere probe,  Alexa Fluor 647 labeled

5 nmole

pnabio

F1014

 G-rich telomere probe,  Alexa Fluor 647 labeled

5 nmole

pnabio

F1020

TelC probe for arthropods, Alexa Fluor 488 labeled

5 nmole

pnabio

F2001

C-rich telomere probe, Biotin labeled

5 nmole

pnabio

F3001

Centromere probe, FAM labeled

5 nmole

pnabio

F3002

Centromere probe, Cy3 labeled

5 nmole

pnabio

F3005

Centromere probe, Cy5 labeled

5 nmole

pnabio

F3004

Centromere probe, Alexa Fluor 488 labeled

5 nmole

pnabio

F3008

Centromere probe, Biotin labeled

5 nmole

pnabio

F3003

Centromere probe, Cy3 labeled

5 nmole

pnabio

F3006

Centromere probe, FAM labeled

5 nmole

pnabio

F5001

CAG repeats, Cy3 labeled

5 nmole

pnabio

G2001-3

A set of 4 PNA oligos against human globin,

3 nmole

pnabio

G2001-10

A set of 4 PNA oligos against human globin

10 nmole

pnabio

MP01-25

ggcaagtgttcttcgga

25 nmole

pnabio

MP01-50

ggcaagtgttcttcgga

50 nmole

pnabio

PP01-25

ggctcaaccctggacag

25 nmole

pnabio

PP01-50

ggctcaaccctggacag

50 nmole

pnabio

RV01

Surrogate reporter vector with GFP for FACS

5 ug

pnabio

RV02

Surrogate reporter vector with GFP and H2KK for MACS

5 ug

pnabio

RV03

Surrogate reporter vector with GFP and Hygromycin-R

5 ug

pnabio

CV01

Cas9 co-transfection vector (CMV promoter)

5 ug

pnabio

CV02

Cas9, Hygromycin R, and GFP expression vector (CMV promoter)

5 ug

pnabio

CV03

Cas9, RFP, puromycin R expression vector (CMV promoter)

5 ug

pnabio

CV11

Cas9 co-expression vector (EF1a promoter)

5 ug

pnabio

CV12

Cas9, Hygromycin R, and GFP expression vector (EF1a promoter)

5 ug

pnabio

CV13

Cas9, RFP, and Puromycin R expression vector (EF1a promoter)

5 ug

pnabio

 

 

 

上海起发实验试剂有限公司是实验试剂一站式采购服务商

1：强大的进口辐射能力，血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。

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7：我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知大品牌批发，欢迎合作。

 

 

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