Huh7细胞的培养有什么技巧？_91化工仪器网

GIBICO DMEM ,10% 胎牛血清，很好养，长的很快，细胞形态：在密度低的时候，是多边形，密度大的时候，偏向于梭形。

1. 细胞核材料：冷藏保存的人肝细胞（M/F0095-P），InViteoGro CP 培养基（Z990003）,和InViteoGro HI培养基（Z990012）从试管内技术（Baltimore,MD）获得。

C2-神经酰胺、C2-二氢神经酰胺和C6-神经酰胺是从Alabaster,AL获得的。抗HuR抗体是从Santa Cruz,CA 获得的， 肌动蛋白是从Cambridge,MA买来的。

HRP共轭的抗兔和鼠的IgM来自Hercules,CA。ECL Western blot 探测箱来自GE 医疗保健（Salt Lake City,UT）。FuGENE6转染试剂来自Roche(Indianapolis,IN)，Maxiprep盒来自Qiagen(Santa Clarita,CA)。

Pan-caspase 抑制器Zvad-fmk和Caspase抑制器设备分别购买于Axxora(San Diego ,CA)和Calbiochern(La Jolla,CA)。Caspase5分析仪来自Calbiochern，caspase5cDNA来自OriGene(Rockville,MD)。

2.用低氧处理肝细胞：冷藏的人肝细胞移出和溶解在InVitroGro CP培养基中。细胞在CP培养基稀释到浓度为0.7 106cells/ml。

肝细胞像胶原一样涂抹在玻片上，然后放置在37℃、5%CO2的培养器里。经过了一夜的培养，肝细胞转移到InVitroGro HI 培养基中。

肝细胞在HI培养基中培养一夜后，玻片放置在一个缺氧的容器(Billups-Rothenberg)里，充满了95%的氮气和5%的二氧化碳，在37℃培养12-72和小时。

氧气的浓度用YSI模型55CE溶解的氧探针(YSI,Marion,MA)测量。用于这些研究中，缺氧的条件是氧气的浓度在0.09 0.001mg/l。

关注本网官方微信 随时阅读专业资讯