反转录PCR-91化工仪器网

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反转录PCR

反转录PCR（Reverse Reaction，RT-PCR）又称为逆转录PCR。其原理是：提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。

价格与周期：

实验项目/片段长度

小于1000bp

1000-2000bp

2000-3000bp

mRNA抽提

600元

600元

600元

反转录合成cDNA第一链

200元

400元

800元

PCR扩增双链cDNA

300元

500元

1000元

纯化PCR产物，克隆PCR产物到标准载体测序

200元

300元

500元

亚克隆到其他表达载体(可选)

1000元

1200元

1500元

全部实验依据实验难度一般需要2-4周的时间

服务流程：

1、mRNA抽提

2、反转录合成cDNA第一链

3、PCR扩增双链cDNA

4、纯化PCR产物,克隆PCR产物到标准载体测序

5、亚克隆到其他表达载体(可选)

样品要求：

1、 样品可提供组织、细胞、RNA、cDNA中的一种,对于提供样本的大致原则如下：组织样本,尽可能提供2 2 2mm3体积或以上,新鲜组织可直接提供，不需处理；对于细胞样本，尽可能提供3 10^6个细胞左右,加适量Trizol处理即可，确保样品适于RNA抽提。RNA、cDNA含量根据同等细胞数量的细胞抽提和逆转录大致界定, 如果提供RNA或cDNA我们要对您提供的材料进行评估。

2、客户提供尽可能详细的背景信息；物种信息，扩增目的基因的NCBI登录号等。

3、由于材料的个体差异及PCR过程中会产生突变等原因，我们不保证获取的基因与参考序列的碱基完全一致。

4、运输要求，液氮或干冰保存寄送。

注：样本应避免各类污染和反复冻融。

提交的产品和资料：

1.测序图谱，酶切位点图；

2.含有目的基因的质粒及穿刺菌；

3.反转录PCR完整的实验步骤、使用仪器、软件设置参数等。