紫外可见分光光度计的使用与注意事项

紫外可见分光光度计是一种应用很广泛的分析仪器。它的应用涉及制药、医疗卫生、化学化工、环保、地质、机械、冶金、石油、食品、生物、材料、计量科学、农业、林业、渔业等领域中的科研、教学，以及生产中的质量控制，原材料和产品检验等各个方面。紫外-可见分光光度计可以用于定性分析、纯度检查、结构分析、络合物组成分析、稳定常数的测定、反应动力学研究等。

根据日常使用经验，提出了紫外可见分光光度计使用中应注意的几个问题，测量结果准确与否，不仅与样品及仪器的使用有关，而且与仪器的保养与维护直接相关。严格执行仪器的日保养、周保养，月保养，可以减少问题的发生，为计量工作提供及时、准确、可靠的检测结果。

1.接通电源，打开分光光度计开关，掀开样品室暗箱盖，预热10分钟。

2.将灵敏度开关调至“1”档(若零点调节器调不到“0”时，需选用较高档。)

3.根据所需波长转动波长选择钮。

4.将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处，用擦镜纸擦清外壁，放入样品室内，使空白管对准光路。

5.在暗箱盖开启状态下调节零点调节器，使读数盘指针指向t=0处。

6.盖上暗箱盖，调节“100”调节器，使空白管的t=100，指针稳定后逐步拉出样品滑竿，分别读出测定管的光密度值，并记录。

7.比色完毕，关上电源，取出比色皿洗净，样品室用软布或软纸擦净。

1、几乎所有的光谱分析仪器(如紫外可见分光光度计、原子吸收分光光度计、一些仪器光度检测器)都是依据的朗伯-比耳定律。

2、很多药品要求相对误差在1%以内。

3、若石英比色皿QC的配对误差为0.1%T，则给使用者带来的分析误差(△A/A)为0.5%。若QC的配对误差为0.5%，则分析误差为3%。

4、检验石英比色皿QC的配对误差时，QC中应装满蒸馏水或溶剂。

5、用超声波清洗比色皿时，一般用20W的清洗玻璃仪器的超声波清洗30分钟，就能解决题目，但尽不能用大功率超声波来清洗比色皿，会损坏比色皿，特别是对那些用黏结方法制作的比色皿。

6、分析测试时，注进比色皿的溶液不要太满，一般到比色皿高度的2/3即可。

7、一般的光电检测器如硅光电池、光电管、光电倍增管有疲惫效应，应避免长时间照射、预热时，打开样品室盖，防止光电检测器受光疲惫。

8、A.owen在1988年指出：“吸光度丈量的正确度，取决于仪器的SBW与试样的自然带宽NBW的比率。SBW/NBW≤0.1时,吸光度正确度可高达99.5%。NBW≥20nm时，2nm的SBW对于吸光度的正确度测试是足够的，可满足大约99%的日常应用。”

9、我国药典规定，用于药检的紫外可见分光光度计的SBW一定要求≤2nm。

10、光谱带宽以nm计，狭缝宽度以mm计。

11、波长正确度在某种程度上，决定光度正确度。

12、噪声限制紫外可见分光光度计对样品分析浓度的下限，并直接影响仪器的信噪比。杂散光直接限制被分析测试样品浓度的上限。

13、杂散光对参比光束和样品光束的影响是相同的。

14、在要求较高的分析测试工作中，紫外可见分光光度计的杂散光应优于0.05%，这样可保证仪器有较宽的线性动态范围。

15、W.slavin以为，杂散光通常在紫外区。实际测试时，应检测整个光谱区的两个端点的杂散光。

16、紫外可见分光光度计的光度噪声与扫描速度有很大关系。一般来讲，扫描速度快的紫外可见分光光度计的噪声也大。

17、紫外可见分光光度计的基线平直度是指每个波长上的光速噪声。测基线平直度时，扫描速度用慢速。

18、紫外可见分光光度计的线性动态范围取决于仪器的杂散光与噪声。

19、在常规分析中，对大多数试样浓度大多取10～100ug/ml，相当0.3～0.7Abs左右最佳。在试样量答应时，试样应选择靠近最佳吸光度值(0.434Abs)的浓度。

20、为了得到更好的光度正确度，在分析过程中，特别要留意选择试样的最大吸收峰处的波长作为测试波长。

21、选择光谱带宽的原则是，在一定的实验条件下，测试吸光度随光谱带宽的变换，以获得最大吸光度值的光谱带宽作为欲选择的光谱带宽。

22、判定被测试样是否有光解现象，首先要看测试数据的变化规律，对同一个试样多次丈量，看其吸光度值是否都是向同一个方向变化，假如是，就可能有光解现象。

(1)仪器应安装在太阳不能直接照射到的地方，室内阳光太强会影响仪器的使用寿命。

(2)保证有适当的实验环境，恒温20℃，相对湿度20%～80%，这是仪器正确使用和维护的前提。

(3)电源与仪器、仪器与计算机、计算机与打印机要连接完好，避免通电时对仪器造成损伤。

(4)确保样品室内没有以前遗留的测量样品。

(1)测量工作开始前，首先应开启计算机，待计算机完全启动后，打开仪器，进入测量工作程序。仪器自动校准。预热20min以上方可开始测量工作，否则仪器不稳定。测量过程中零点有0.02nm的变动就会影响测量结果的准确。

(2)仪器预热完毕，开始测量前，检查仪器波长656.10nm点，测量结果偏差应在±0.08nm内，若超出此范围，需重新校正仪器。仪器完全由相应的软件控制(即由计算机控制)，点击相应的程序，可自动校正。