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逍鹏生物的老司机为此做了总结。。。。
选 好 细 胞 冻 存 液 是 基 础
使用动物血清常常会遇到很多问题，例如：病毒感染、其他动物源的污染。使用无血清制品培养与冻存细胞，可以消除这方面的隐患。此外，无血清冻存液可以确保细胞在化学成分固定的条件下生长，更进一步确保细胞冻存时的条件稳定
慢 慢 做 冷 冻
若您养的是贴壁细胞，请先将细胞消化下来；若是悬浮细胞，请直接按以下步骤进行：
1. 以200-300g离心3分钟，弃去上清，收集细胞。
2. 用BI无血清冻存液将细胞重悬（不需回温），将细胞密度调整为3~5x106 cells/ml，添加到冻存管中（一般每管1ml）。
3. 建议将含有细胞悬液的冻存管放进渐进降温盒或是保温杯中，置于-80 C冰箱6小时以上或是过夜（或不需要程序降温)。
4. 将冻存管迅速移到液态氮中保存。
5. 冻存24小时后，建议检测细胞存活率。
迅 速 做 复 苏
1. 将细胞冻存管由液态氮中取出，置于室温回温，不用水浴溶解。此时可准备新鲜培养基、无菌15ml离心管、培养瓶。
2. 在生物安全柜内，直接以少量培养基反复冲融，使细胞团块化冻。
3. 先在无菌15ml离心管中加入5ml培养基，再将化冻的细胞悬液加入离心管中。以200~300g，3分钟离心收集细胞。
4. 倒去上清液，重悬细胞，移到培养瓶中培养。
hESC were frozen in CryoStem and were thawed into NutriStem hESC XF Medium
（H1 hESC BGO1V/hOG cells）
1 hour post-thawing
Day 1 Post-thawing
Day 4 Post-thawing
yoyo~~ BI 冻 存 液 来 一 套
不含动物成份
细胞冻存与复苏后，平均活细胞回收比例超过90%
Serum-Free Cell Freezing Medium
无血清细胞冻存液，货号: 05-065-1A/B
无血清培养的细胞应该使用无血清的冻存液保存，以保持无血清培养体系的完整。本冻存液不含蛋白及动物组分，主要成分为DMSO和甲基纤维素。
Cryostem ACF Freezing Media
无血清干细胞冻存液（Optimized for Stem Cell），货号: 05-710-1B/E
CryoStem对所有种类的细胞都有非常好的冻存效果，该产品经过验证，特别适用于人胚胎干细胞和人原代细胞的冻存。用CryoStem冻存融解后，细胞表现出极佳的复苏率、生长活性、贴壁性和传代能力。
MSC Freezing Medium
无血清间充质干细胞冻存液，货号: 05-712-1B/E
即用型溶液，特别适用于人类间充质干细胞冻存，用MSC冻存液冻存融解后，细胞表现出极佳的复苏率、生长活性。
关于 细胞冻存和复苏
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