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如何确定数字PCR的LOB?——中国生物器材网

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放大字体  缩小字体    发布日期:2019-05-27  来源:仪器信息网  作者:Mr liao  浏览次数:313
数字PCR技术是一项新的核酸检测和定量技术。空白检测限LOB (Limit of Blank)是判断数字PCR技术检测能力的重要参数。
LOB(the limit of blank)是一项统计学实验参数。在可信度大于95%的概率下,对于不含有分析物的样品(空白样品),LOB是可能观察到的最高检测结果。换句话说就是最大的假阳性数。 为什么要在数字PCR中计算LOB ? 在数字PCR (dPCR)中,多种因素可以引起假阳性。定量核酸时确定假阳性的cutoff对dPCR检测的稳定性至关重要。为了定义这个cutoff,检测阈值通常设置在LOB值之上,而在检测校准期间必须首先为每个目标确定空白LOB值。此外,实验LOB值对于判断反应是正还是负以及计算LOD值都是必要的。
95%置信度LOB如下表所示: R:重复次数,一般≧30 和 :分别为假阳性个数的平均值和标准方差
corr:校正平均值
当 =0(即假阳性永远不会出现),则LOB(95%)=0
当LOB为非零时,可以用概率分布加权的 减去假阳性 的方法来校正实验样品中目标核酸的量。 更多LOB值介绍可登陆Gene- 数字PCR学堂(www.cycloudbio.com数字PCR学堂快速入口)统计工具查看,您也可以选择其他感兴趣的应用教程,其中包含从实验设计到数据分析的详细工作流程。 您还可以通过搜索导航工具直接搜索特定的项目( dPCR的DNA准备 , 荧光溢出 等),或点击我们的 HOW TO 选择您需要的部分(设计、分析、报告)。
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