改善极性、酸性、碱性和酚类化合物的分离

改善极性、酸性、碱性和酚类化合物的分离 - ACE C18-Amide色谱柱 点击次数：47 发布日期：2019-4-19 来源：本站 仅供参考，谢绝转载，否则责任自负
改善极性、酸性、碱性和酚类化合物的分离
用于UHPLC和HPLC的高柱效2 m、3 m、5 m和10 m颗粒
超惰性，可获得最佳性能和可重现性
ACE C18-Amide液相色谱柱
用于提高极性保留和替代选择性
方法开发的理想色谱柱选择
■ 相对C18和C8色谱柱，对极性分子 - 特别是酸类，具有替代选择性
■ 与100%水含量的流动相兼容
■ 用于UHPLC、HPLC和制备型分离的高柱效2 m、3 m、5 m和10 m颗粒
■ UV和LC/MS兼容性的低流失

推荐应用
■ 小分子水溶性分析物和极性化合物
■ H键给予体、酸类、碱类和酚类化合物
■ 小分子多肽
为什么ACE C18-Amide液相色谱柱可以提供替代选择性？
■ ACE C18-Amide将C18与极性酰胺基结合在单一配体上
■ 延长间隔区技术可以额外延长色谱柱的使用寿命

利用ACE C18-Amide液相色谱柱的选择性能力将色谱峰分开
分离度方程可以确定影响分离度的参数：N、 和k。近年来，
重点关注使用超高效 UHPLC 色谱柱（如ACE Excel 2 m色
谱柱）作为实现分离目标的手段。

然而，选择性往往被忽视。
在影响分离度的三个参数中，选择性是最为重要的（参见图1）。
通过利用柱效和选择性，通常可以实现更好和更快的分离。
ACE C18-Amide液相色谱柱是ACE系列键合相的最新产品，其可以提供互补选择性和2 m、3 m、5 m和10 m粒径的选择，以开发坚固耐用的UHPLC和HPLC方法。
图1 N、 和k对分离度(Rs)的影响
对于N = 10,000、k = 4和 = 1.1的典型分离

增加N、 或k可以增加分离度（Rs），但是从上图可以看出，N或k的增加都会迅速降低回报率。增加选择性（ ）则不会发生这个问题，因此其在开发分离方法时是这三个变量中最为重要的优化参数。
利用ACE键合相的固定相选择性能力将色谱峰分开
图2阐明了两种ACE键合相即C18-Amide与C18之间的差异。
尽管这两种键合相均可以提供可能的来自它们各自C18链的强疏水作用，但嵌入C18-Amide相中的酰胺基会引入额外的相互作用模式，最终增加极性化合物的保留并提供替代选择性。

样品：1）间苯二酚 2）儿茶酚 3）2-甲基间苯二酚 4）4-甲基邻苯二酚5）3-甲基邻苯二酚 6）4-硝基邻苯二酚
流动相：25:75乙腈/27mM H3PO4（溶于水中）
色谱柱尺寸：150 x 4.6mm
流速：1.50ml/min
温度：30℃
波长：270nm
ACE C18-Amiede液相色谱柱可以使极性选择性增强
ACE C18-Amide与领先C18 UHPLC色谱柱的比较

色谱柱尺寸：50 x 2.1mm
样品：1）间苯二酚 2）儿茶酚 3）2-甲基间苯二酚 4）4-甲基邻苯二酚 5）3-甲基邻苯二酚 6）4-硝基邻苯二酚
流动相：25:75甲醇/25mM H3PO4（溶于水中）
流速：0.30ml/min
温度：30℃
波长：214nm
比较数据不代表所有应用。
利用替代选择性来进行方法开发
酸性、碱性和中性化合物的分离

样品：1）甲基苯基亚砜 2）吲哚洛尔 3）3-羟基苯甲酸 4）1,2-二甲氧基苯 5）小檗碱 6）杨梅素 7）胡椒碱 8）白杨素
流动相：A = 20mM甲酸铵（溶于水中）（pH 3.0）B = 20mM甲酸铵（pH3.0）（溶于90:10（v/v）甲醇/水中）
梯度：在5分钟内3 100% B
色谱柱尺寸：50 x 2.1mm
流速：0.60ml/min
温度：40℃
波长：254nm
与100%水含量的流动相兼容
葡萄酒中有机酸的分离

样品：1）草酸 2）酒石酸 3）苹果酸 4）乳酸 5）抗坏血酸 6）柠檬酸
流动相：40mM NH4H2PO4（溶于水中）(pH 2.5)
色谱柱：ACE Excel 3 C18-Amide, 250 x 2.1mm
流速：0.21ml/min
温度：25℃
波长：214nm
ACE C18-Amide可以提供替代选择性
食品和饮料添加剂 - 香草醛

样品：1）香草酸 2）4-羟基苯甲酸 3）香草醛 4）4-羟基苯甲醛 5）愈创木酚 6）乙基香草醛 7）丁香酚
流动相：A = 0.1%甲酸（溶于水中） B = 0.1%甲酸（溶于乙腈中）
梯度：在10分钟内30 55% B
色谱柱尺寸：150 x 4.6mm
流速：1.00ml/min
温度：40℃
波长：260nm
类固醇

样品：1）泼尼松 2）泼尼松龙 3）雌三醇 4）皮质酮 5）11a-羟孕酮 6）11-酮孕酮 7）21-羟孕酮 8） -雌二醇 9）17 -雌二醇 10）17 -乙炔基雌二醇
流动相：A = 0.1%甲酸（溶于水中） B = 0.1%甲酸（溶于乙腈中）
梯度：在10分钟内25 80% B
色谱柱尺寸：50 x 2.1mm
流速：0.40ml/min
温度：25℃
波长：260nm
有保证的可重现性和完全可扩展性
ACE C18-Amide的可重现性扩展

样品：1）尿嘧啶 2）4-羟基苯甲酸 3）乙酰水杨酸 4）苯甲酸 5）2-羟基苯甲酸 6）对羟基苯甲酸乙酯
流动相：35:65乙腈/0.1%TFA（溶于水中）
温度：22℃
波长：254nm
将可用的2 m、3 m、5 m和10 m粒径与从UHPLC到制备型HPLC规模的一系列柱尺寸相结合，可确保方法可重现地放大或缩小。
图8中的色谱图显示，当硅胶批次和硅烷批次改变时可以获得卓越的可重现性，并当粒径和柱直径改变时可以获得可重现的可扩展性。
产品的可用性和规格
 
为了获得最佳色谱柱寿命，推荐使用2-8的pH范围。为了在较高的pH值下增加色谱柱寿命，必须考虑有机缓冲液、低缓冲液浓度、高%有机溶剂和低温。
为了在HPLC条件（高达5000psi/350bar）下进一步延长色谱柱寿命，推荐使用ACE保护柱芯柱或ACE HPLC柱前过滤器。
为了在UHPLC条件（高达15000psi/1000bar）下进一步延长色谱柱寿命，推荐使用ACE UHPLC柱前过滤器。
对于高达5000psi（350bar）的HPLC色谱柱连接器，推荐使用PEEK手紧接头（p/n ACE-CC10）。
对于高达15000 psi（1000bar）的UHPLC色谱柱连接器，推荐可重复使用的接头（p/n EXL-CC10）。
ACE 是Advanced Chromatography Technologies Limited的注册商标。ACE Excel 是Advanced Chromatography Technologies Limited的商标。Advanced Chromatography Technologies Limited承认Agilent Technologies Inc.、Phenomenex Inc.、Thermo Fisher Scientific和Waters Corporation的注册和未注册商标，且与上述这些公司没有任何隶属关系。