为什么需要另一种新的C18相?
使用超纯、超惰性硅胶具有许多公认的优点,包括改善可重现性、寿命和色谱性能(特别是碱性分子)。
然而,由于超惰性硅胶表面不再有效促进分离,所以用高纯度硅胶制造的C18柱可以显示出接近相同的选择性。
因此,通过改用替代制造商的同等产品,一个带头品牌的问题分离很可能不会得到显著改善。
多年来,经验丰富的色谱学家们一直在寻求由这样带头的C18色谱柱品牌展示的、具有可靠性能和可重现性优点的相,但另外也为他们的挑战性应用提供了所需的替代选择性。
ACE C18-AR有何不同?
C18键合相目前主导着HPLC市场,最近的调查显示,它们仍然占据了所有HPLC色谱柱销售量的50-60%。
然而,近年来,由于它们提供的替代选择性,苯基键合相的使用显著增长。
据估计,苯基相目前占HPLC色谱柱销售量的10-15%,其它成为C18相之后的最大子类别。
ACE C18-AR色谱柱采用了特殊开发的配体,将C18链与完整苯基官能团结合在一起,从而将C18和苯基特征的优点结合到单个相中。
基于与ACE C18相同的超惰性、超纯、超可重现性的硅胶平台,独特的ACE C18-AR色谱柱为C18柱提供了替代选择性。
ACE C18-AR显示出对C18键合色谱柱的替代选择性
我们需要一个C18相来提供不同的色谱分析和改善的分离度- 所提供的ACE C18-AR 某制药公司的高级分析师
何时应用ACE C18-AR?
由于其相似的疏水特性,ACE C18-AR色谱柱可用于通常会考虑 标准 C18色谱柱的应用中。
然而,由于其完整的苯基官能团,ACE C18-AR还被推荐用于涉及含有芳香族官能团的化合物的分离。
本手册中包含的应用证实,ACE C18-AR可用于改善C18色谱柱上存在问题的分离。
独特的ACE C18-AR相为C18色谱柱提供了替代选择性,但对规定为C18键合色谱柱的方法,保留了有效的选择。
在许多情况下,证实不适合C18色谱柱的相同评估条件被证实适用于C18-AR色谱柱,这就避免了冗长的方法再开发。
应用#1 - 水溶性维生素
样品:1)吡哆醇2)对氨基苯甲酸3)泛酸4)叶酸5)氰钴胺素6)d-生物素7)核黄素
色谱柱尺寸:150 x 4.6mm
流速:1.50ml/min
流动相:A) 20mM KH2PO4 (pH 2.8) B) 20mM KH2PO4 (pH 2.8)(溶于50:50 v/v甲醇/水中)
线性梯度:在15分钟内20%-70% B
温度:40 C
检测:UV, 205nm
为了提高方法的耐用性,最好尝试并进一步改善分离度。由于评估条件已经最佳,我们现在研究改用另一种C18色谱柱品牌是否可以改善我们的关键对(峰2、3和5、6)的分离。
这种方法代表了目前在许多实验室中开展的方法开发策略。
如上述结果所示,Zorbax XDB C18和Sunfire C18色谱柱不再分离关键对2、3,而Luna C18(2)色谱柱显示关键对2、3的分离度略有改善,但当前关键对5、6 仅得到了部分分离。
然而,独特的ACE C18-AR相可以提供与带头的C18色谱柱品牌完全不同的分离度。
两个关键对的分离度得到显著改善,方法的耐用性也不再是问题。
实际上,现在可以进一步优化色谱柱尺寸和评估条件(以减少分析时间)。