应用电子显微镜高分辨率的观察有机细胞壁

应用电子显微镜高分辨率的观察有机细胞壁

  在观察过程中遇到的问题及假象
  使用扫描电镜，通常难以区分小范围的形态特征和非有机质及粘附在
有机结构上的物体。潜在的无机物的假象可能包括残留在揭片上的矿物质
，以及酸蚀刻时沉积的粉末状方解石。使用透射电镜，在高倍镜下对细胞
壁小碎片的确认和定位是一个难题。标准蚀刻或深度蚀刻将会导致困难进
一步加大，主要是由于细胞壁疏松并很容易破碎，或起泡而毁坏。此外，
在揭片中，矿物质会弄钝刀口，这样有碍超薄切片。
  详细的高分辨率的观察对标准揭片技术提出了许多问题。实施的实验
方案进入了一种两难的境地。通常，我们想尽可能从有机细胞壁上除去矿
物质，但是用酸进一步处理又会毁坏细胞壁。正在消失的揭片技术提供了
：(”一种对细胞壁损害最小的蚀刻标本的方法；(2)用一种溶剂支持蚀刻
的细胞壁，去掉所有的醋酸膜，并一起去掉牢固的矿物质和粉

  高倍下撕片技术运用中出现的问题
  第一个问题是，酸蚀刻时的起泡可能导致细胞壁的严重损害。对于平
行于岩石表面的细胞壁(典型纵向切片)和像薄壁组织和木质部等组织中较
薄的细胞壁，这种损害尤其严重。用标准的7％—6％蚀刻强度的酸会导致
重大损坏。此外，细胞壁碎片会疏松，在高倍光学显微镜下造成假象。这
对解释像孔和壁层加厚这样细微尺度的结构是一个大问题。第二个问题是
，有机壁物质可能会随矿物层而间接地固定到醋酸膜上。随后的揭片脱矿
作用将去掉许多的有机物质，特别是在纵向壁上。第三个问题是，与蚀刻(
厚300—500μm)过程中粉末状的残余物(对碳酸盐煤核的方解石)有关。这
些可以通过脱矿作用部分去除，但是，由于这些残留物会深深地渗入到醋
酸膜中，仍会残留一定数量

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