蛋白质N端测序样品要求——中国生物器材网

检测仪器:岛津 PPSQ-31A 蛋白多肽自动测序仪 
一、 蛋白质N端测序的主要应用:
1.样品：蛋白质，多肽样品的氨基酸序列测定
2.优势：能连续测定 60 个以上的氨基酸序列
3.来源:天然提取（动物/植物/微生物）；合成多肽；重组蛋白等
二、 样品要求:
1.纯度: 95（基于摩尔数）
2.含量:50-100pmol(液体体积控制在 20ul)
3.修饰封闭:N 端未被封闭
4.样品形式:液体；干粉；PVDF 膜
5.无干扰物:蛋白酶；氨基酸；胺；盐分；乙醛；去污剂等
三、 客户提供信息:
1.纯度：纯度检测结果及图谱信息
2.修饰：样品可能修饰情况
3.制备方法：如 SDS,HPLC 及其它方式
4.验证目的：提供理论序列
5.表观分子量
其它注意事项：
1.邮寄要求：使用干冰冷冻保护
2.液体样品：
可用溶剂：蒸馏水、TFA 水溶液、醋酸水溶液、乙氰水溶液以及三甲基胺水溶液。
不可用的溶剂：氨盐、Tris 等，含有 1 级、2 级胺的盐溶液，含有 SDS 的溶液
3.固体样品：
干燥处理的样品，请先确认干燥处理前的溶剂中不含有上述不兼容的溶剂。如果含有不兼容的溶剂时，请告知我方检测人员。
4.PVDF 膜：注意以下方面
1)样品量：5-8 条泳道，每条泳道的样品尽量用最高浓度样品，上最大体积（尽量使条带长胖为正常的 2-3 倍宽度）
2)硝酸纤维素膜：具有耐药性，不能使用。
3)在电转印中使用的缓冲液尽可能不含甘氨酸。在使用了含甘氨酸的缓冲液时，请告知我方检测人员。
4)染色剂推荐使用考马斯亮蓝（CBB-R250）。
5)推荐使用下列的 PVDF 膜：