角质层制片光学特征

角质层制片光学特征-叶的下角质层观察显微镜

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  甘油胶是包埋角质层的理想制片荆。它不但具有极好的光学特性，易
于操作，而且在包埋期间仍可处理角质层。包埋前，角质层要存放在甘油
水溶液中，并加几滴石炭酸，以防止真蔺生长。被包埋在加拿大树胶或合
成树脂中的角质层，首先需要将其放到通常会毁坏易碎材料的二钾苯或乙
酸中脱水.因为粘度高，用这些溶荆包埋的玻片通常很厚，并且角质层不容
易放平。经过一些年以后，加拿大树胶还会泛黄变暗.
  用甘油胶包埋的一个主要问题是产生气泡。市场上出售的新鲜的甘油
胶常含有大量的水分和空气。为排除其中的空气，并去掉多余的水分，可
将甘油胶置于烧杯中，烧杯放到水浴锅中，加热几天，直到它的颜色变成
深黄色。在用甘油胶包埋以前，角质层本身应在纯甘油中脱水至少1天。在
实际包埋时，显微镜玻片可放到一个具精确温控的加热盘中，沮度控制在6
5℃-73℃，用玻瑞棒将加热的甘油胶移到玻片上。角质层皿于甘油胶中，
并用一大小适中的盖玻片盖上。较大的角质层可能会有些问题，因为它们
不能完全放平，因此需要用盖玻片支持。为此目的，一个碎的盖玻片都比
橡皮泥要好，因为前者在照片中不会明显地显示出来。为了防止随后的干
燥，在甘油胶变硬之后，盖玻片可用无色的指甲油来封存。不过，对一些
较大的或较厚的玻片，需要长达数月甘油胶才会变硬。
  如上所述，甘油胶的优点之一是在包埋时角质层还可以处理。当玻片
置于加热盘时，可将角质层在玻片上摊开。而且，叶的下角质层通常还较
牢固地粘在一起.需要机械分离.当把它们移到玻片上加热的甘油胶中时，
最好用细针将其分开。
  角质层在固定前还可以染色.但在染色时，由于角质层非常容易碎，所
以很容易受到破坏。4种染色剂都有明显不同的特征。最常用染色剂有:傅
斯麦棕、甲基绿、亚甲蓝和番红T，其中稗斯麦棕能产生最自然的色彩。所
有这些染色剂都要在1%的水溶液中使用，并需要染几分钟。如果有必要，
还要放在40℃条件下。染色以后.角质层要用水和热的甘油冲洗。不同的种
类，即使采自同一采集地点，染色效果也会不同。

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