X射线辐照在候选放射抗性基因的作用——中国生物器材网

用转座子进行全面的基因筛选是系统鉴定抗性基因的新方法。本研究旨在利用该技术鉴定食管鳞状细胞癌中的候选放射抗性基因。转座子是一种碱基序列，可以随机转换到基因组中的另一个位置。通过在转座子中插入巨细胞病毒启动子作为转录激活因子，新位置的下列基因变得过表达，位于转座子插入位点的基因被下调。因此，可以获得使用转座子方法具有差异过表达或下调基因的各种转座子标记的细胞。在转座子标记的细胞照射后，可以选择候选放射抗性基因以检测转座子在存活的细胞中的位置。
     
图2. MT-CO1下调细胞的放射抗性。 在7-Gy照射后1,3,5,7和9天测量细胞存活率。 在第5,7和9天，MT-CO1下调细胞的存活率显着更高（P 0.001）。 误差线表示平均值的标准偏差。 MT-CO1，细胞色素c氧化酶1; RRCs，抗辐射细胞。
  照射后的Caspase-3活性。 照射5-Gy后，将亲本（TE4）细胞和RRC（MT-CO1-下调细胞）与比色底物DEVD-pNA一起温育24小时。 Caspase-3活性测量为405nm处的吸光度，并且发现在照射后亲本细胞中的Caspase-3活性更高（* P 0.001）。 误差线表示平均值的标准偏差。 MT-CO1，细胞色素c氧化酶1; RRCs，抗辐射细胞。
 
结果：共检测到11个基因作为候选放射抗性基因。细胞色素c氧化酶1（MT-CO1）是一种通过激活caspase级联参与细胞凋亡的酶，是鉴定的候选基因之一。MT-CO1诱导的放射抗性的下调通过抑制放射抗性食管癌细胞中半胱天冬酶级联的激活而发生。
 
文章来源：
Downregulation of cytochrome c oxidase 1 induced radioresistance in esophageal squamous cell carcinoma