光学显微镜有景深对于CCD 影像z轴拍摄清晰度的影像

光学显微镜有景深对于CCD 影像 z 轴拍摄清晰度的影像

CCD 影像的 z 轴间距与显微物镜之聚焦深度的关系一般光学显微镜有景深（Depth of Field）的缘故，

显微物镜的聚焦深度（Depth of Focus）为 3.5 微米，亦即待测物在景深
范围内，CCD 摄影机皆能撷取到聚焦清晰的影像。

所用到的聚焦度计量法则，主要是根据 CCD 摄影机所撷取影像中的像素
灰阶值变化剧烈的程度，来判别是否在焦平面上，所以若影像的 z 轴
间距小于景深，对同一 CCD 像素而言，在景深范围内的灰阶强度值
较无剧烈的变化，导致重建出来的结果较差；

若影像的 z 轴间距大于景深，即我们不是以上下间隔 3.5 微米的影像，来求得每层影像中的
焦平面区域，而是以上下间隔 7 微米的影像，来推得每层影像中焦平
面的区域，重建出来的结果，CCD 重複撷取影像 90 张再取其平均值，影像张数共 23 张，

重建的演算法则为最小相邻反捲积。

可以察知当影像间距大于景深时，虽然影像中灰阶强度剧烈地变化，但相对地 z
轴解析度就不好，当然重建出来的待测物三维表面结果，其整体解析度就较差，

显微物镜的规格，来决定影像间的 z 轴间距，故本文第四章节所重建的结果，其影像间的 z 轴间距
大小为显微镜物镜焦深 3.5 微米，使得 CCD 在撷取影像过程中，能同
时兼顾到影像中灰阶强度变化的程度与 z 轴解析度