骨头或者牙齿怎样制作用于显微镜观察的切片

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骨头或者牙齿怎样制作用于显微镜观察的切片

骨头 牙齿染色法
 
  骨头 牙齿为动物体内最坚硬之组织，欲制成切片有二种方法，其
回染色法一为利用脱钙液  溶解其坚硬之钙质使组织软化，即可制作切片。
  另法用锯子将组织锯成0.2 ~ 0.3㎝厚度，再用磨石磨成100μ~ 150
  μ之厚度后加以染色及封盖。 
 
第一法：切片法 
  使用脱钙完毕之组织材料，移入内中和一天，经流水洗之，
  后依脱水法，包埋法，制作8μ~ 15μ左右之切片。用染色法，
  染色程序依染色法，其他采用及均可。 
 
第二法：手工研磨法 
  骨头 牙齿于流水中洗净，放进Acetone内脱取脂肪约一星
  期后以流水洗一天，续于20 %漂白剂中漂白一星期，用流水
  洗一天，于日光下晒干。用锯子将组织锯成0.2 ~ 0.3㎝厚度，
  用手指压住于磨石上推磨成100μ~ 150μ之厚度，再以细磨石
  加Glycerin磨至表面光滑，于流水中洗，再经95 % Alcohol浸透
  一天，放于室内干燥后以Balsam封盖之。 
 
第三法：薄片封盖法 
  以手工推磨而成之薄片的封盖，是Balsam只黏贴于薄片周围
  而不渗透于薄片组织内，因Balsam如渗透入组织细胞内，组
  织细胞之轮廓被透明化无法观察，是故，Balsam须以酒精灯
  煮沸浓缩，但切忌过渡免生气泡，将刚煮沸过之Balsam滴于
  组织上，Cover Glass封盖后用手轻压，随即放入冷水内使其迅
  速凝固，Cover Glass须以圆形为主，后Cover Glass周围以未稀
  释之油漆加以封之。 
  诸须先以Trichloressigsaure 10 % 之Formalin 10 %混合液脱钙处
  理，后以一般正常切片法包埋制作。H-E 染色即可。
  可观察细胞形状、骨小板、股板层、Horris管、 Volkman管、
  骨小洞、骨小管等。 
 
第四法：手工磨成薄片染色法 
  (1)?薄片放进1 % NaOH 24 ~ 48 hrs.，薄片放置时勿重叠。
  (2)?Distilled Water洗10 mins.。 
  (3)?1 % AgNO3 24 hrs.。 
  (4)?Distilled Water洗10 mins.。 
  (5)?中性1 % Formalin还原24 hrs.，此时薄片成黑色。
  (6)?黑色薄片以流水洗30 mins.。 
  (7)?于室内或38℃恒温箱内干燥之。 
  (8)?用细磨石加轻磨薄片两面使黑色成淡黑色。
  (9)?移入流水洗1 hr.，经95 % ~100 % Alcohol脱水。
  (10)?用Xylene透明，浓缩之Balsam封盖。 
  染色结果  骨小洞、骨小管与其他组织均呈鲜明黑色。
  如欲观察Harris管以煮之染色可得极鲜艳之染色效果。