细菌的吸光值测试实验简介

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细菌的吸光值测试实验简介-抑菌试验检测显微镜

细菌培养
将沙门氏菌（Salmonella enterica）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、肠炎弧
菌（Vibrio parahaemolyticus）分别加入不同容器之 LB（Difco LB Broth,Miller
（Luria-Bertan））培养液中（肠炎弧菌（Vibrio parahaemolyticus）以加入 2％NaCl 之 LB
培养液中培养），于 37℃、160rpm 之培养箱培养四至六小时，得含菌培养液。

五种食材萃取液的抑菌测试

（一）抑菌圈试验
于无菌操作台上，取出培养好之沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、肠炎弧菌，用无菌棉
棒沾取三种含菌培养液，先横向、后直向地均匀涂抹于培养基上。
接着将镊子沾酒精后以火烤消毒，再用镊子夹取环状纸锭（paper disc）充分浸湿
于蒜、芥末酱、姜、葱、辣椒之萃取液及无菌食盐水，每次夹取都需重复镊子消毒之动
作；再分别置于三片各涂好沙门氏菌、肠炎弧菌、金黄色葡萄球菌的培养基上，并用签
字笔于培养皿底标出萃取液种类。
最后将平板倒放于 37℃培养箱中培养一个晚上，隔天以直尺测量各萃取液于三培
养基上，环状纸锭四周之抑菌圈直径大小，以㎝为单位，并纪录之。
（二）吸光值测验
以每瓶 19ml 分装未高温灭菌之 LB 培养液，未加入 2％ NaCl 12 瓶，已加 2％ NaCl
6 瓶；以高压蒸气灭菌之（121℃，1.1 公斤/平方公分）。接着将三菌加入菌液中，沙门
氏杆菌与金黄色葡萄球分别各加入 6 瓶未加入 2％ NaCl 之培养液，而肠炎弧菌则加入已
加 2％ NaCl 的 6 瓶培养液中，并分别用签字笔标示菌种，后于 37℃、160rpm 之培养箱
培养 5 小时。
于培养好的三种菌液（各 6 瓶）中，分别将蒜、葱、姜、辣椒、芥末酱之萃取液及
无菌食盐水加于 6 瓶菌液中，一瓶一种各 1ml；混合后以定时器计时 0 min 与 60 min 两
个时间点。