显微镜观察保细胞器结构

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显微镜观察保细胞器结构-纯化细胞实验仪器

破碎细胞实验监控图像显微镜厂商 咨询：010-64034191

  对于像肝脏或肾脏这样的组织，匀浆相对简单;对于其他的组织和细胞培养物，
必须评估各种技术以确定一种策略来破碎细胞而不损伤目的细胞器。不管选择什么技术，
建议用显微镜监控整个过程以确保细胞器结构上的完整。器官和组织在研磨或剪切以

后，碎片悬浮在通常含有0.25mo1/L蔗糖的补加了单价或二价阳离子、蛋白酶抑制剂和
鳌和剂等的等渗匀浆缓冲液中。与肝、肾等实体组织相比，多数组织培养细胞在

使用玻璃或Teflon/玻璃匀浆器时在等渗溶液中很难匀浆。相反，培养细胞在收获后被悬浮
在低渗介质中，一旦细胞被匀浆，就加上浓缩的蔗糖溶液调节匀浆物到等渗状态:

匀浆物在低渗溶液中的时间要越短越好，通常从开始收获细胞到匀浆结束不要超过5分钟一匀
浆物在低渗溶液中时间太长产生两个问题:

细胞器开始破裂，由于溶酶体酶的泄漏.各种物质开始降解。为了避免低渗处理细胞，
可以用甘油处理(Graham and Sandal] 1979)用这种方法，细胞从周围介质中吸收甘油并变得高渗:
这些细胞接着放人等渗或略微低

渗的介质中，多数细胞在不匀浆的情况下也会破裂，也有一些需要匀浆。甘油的浓度
高渗或低渗溶液中的蔗搪、处理的时问以及是否需要匀浆都取决于细胞的类型