荧光显微镜的应用

荧光显微镜检查

  经荧光染色的标本应当天镜检，不宜存放，荧光显微镜下观察时
间也不宜太长，因荧光会逐渐消退。作油镜检查时，标本宜用无荧光
油和盖玻片封埋。常用封埋剂为1 份pH9.0 0. 05mol/L碳酸钠缓冲液
与9 份无荧光甘油混匀后即成。观察标本的特异性荧光强度一般用+
号表示。

  一表示无荧光；±为极弱的可疑荧光；+ 为荧光较弱但清楚可见
；2+为荧光明亮；3+-4+ 为荧光闪亮。临床上根据特异性荧光强度达
2 + 以上判定为阳性，而对照管应呈一或±。根据呈2+的血清最高稀
释度判定特异性抗体效价。

  在荧光显微镜检查中，非特异性荧光染色是影响检测结果的主要
问题。非特异性荧光染色可由于某些抗原的自发荧光及交叉反应等多
种因素，可通过对照进行鉴别与排除。

  有些则要通过对抗原的纯化、抗体的提纯、提高荧光抗体结合物
的比例等各方面，寻找原因逐项清除。

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