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光学显微镜物镜聚光能力小于数字孔径大的物镜

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放大字体  缩小字体    发布日期:2019-03-15  来源:仪器信息网  作者:Mr liao  浏览次数:695

光学显微镜物镜聚光能力小于数字孔径大的物镜

  数值孔径(N.A.)小的物镜聚光能力小于数字孔径大的物镜。N.A.
对空间分辨率也很重要:N.A.大的透镜比N.A.小的透镜更能分辨标本中
的精细结构。放大倍数也很重要:高倍放大物镜(100 x )的聚光能力
弱于60 x或40x 的物镜。

  因此用40 x或60 x,N.A.为1.4 的油镜可以获得最好的最明亮的图
像,因为这样镜头能收集绝大部分的光、很好的分辨结构、并能有效地
放大并传至检测器、以高对比度成像(lnoue 1986)。

  要获得最佳效果,还要正确选择盖玻片的厚度,而且观察荧光时,
要在盖玻片的正下面,成像时则需标本固定介质的折射率与浸润镜头的
介质的折射率(常为1.5 )相匹配。要对含有水的标本成像,则需要一
种特殊的水浸润镜头

  倒置显微镜的光路。光线从光源(如水银灯或氙灯)发出后,特定
波长的光线通过一个激发光滤光器,以激发特定的荧光染料。光线然后
到达二色光束分裂器,使得短波长的光反射至标本。波长较长的发射光
却通过光束分裂器。

  发射光滤光器将所有来自激发光滤光器的光线减弱,却能让标本发
射的任何荧光有效地通过。发射光的波长总是比激发光的波长大。插图
:DAPI波光器的透光曲线。

  点线表示激发光带通滤光器,实线表示光束分裂器,短条线表示发
射光带通滤光器

(本文由上海光学仪器厂编辑整理提供, 未经允许禁止复制,转载须注明网址http://www.sgaaa.com)

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