荧光显微镜的构造与一般光镜有何不同及其应用

荧光显微镜

  荧光显微镜的使用为病害的诊断和微生物的鉴定开辟了新的途径，简化
并加快了诊断步骤，特别是在利用荧光抗体后，更加改进了诊断技术。

  荧光现象光是有一定能量的电磁波，它可以影响所照射到的分子中的电
子活动。分子中的电子如果不是很牢固的，在光波振动的影响下，可以开始
发生运动，离开它原来运动的轨道.与照射的光波的振动发生共振。

电子的振动需要能量，这是由照射的光线供给的。我们说分子吸收光，就是
发生这样的作用。

荧光显微镜的构造荧光显微镜的结构与一般明视野显微镜相同，主要的区别
有以下三个方面:

①光源不同一般是用汞弧光灯的光波，非但光度强.而且更主要的是能产生
足够的短波光，效果比一般白炽灯好。汞弧光灯的光波，在紫外线部分是20
0^-400nm.可见光部分是400-780nm，红外线部分大于780nm。这种灯要用较
高的电压(达18000V )，并且价格也较贵。

②暗视野聚光镜为了便于看清荧光，一般都是用暗视野聚光镜.弱的荧光用
明视野聚光镜是不容易看清的。暗视野聚光镜带来的另一个有利情况，就是
大部分紫外线都被这种聚光镜偏转掉，可以保护工作者的眼睛。为了充分发
挥保护作用，所用的物镜的数值口径一般都要比聚光镜的数值口径小0.05.

③滤光片调节光波水银弧光灯产生温度很高的红外线和对人眼有害的紫外线
，一般用三个滤光片解决:①隔热滤光片，放在光源与聚光镜之间，消除红
外线。红外线产生热，并且与荧光的产生无关。

②激发光滤光片，放在聚光镜的下面，能够激发玻片上荧光物产生荧光的短
光波通过，而其余的光波都吸收。这种滤光片颜色很深，设计时只使绿光、
蓝光、紫光和紫外线通过。

③屏障滤光片，放在显微镜的物镜和目镜之间，除去残余的激发短光波，只
有荧光被看到。屏障滤光片的设计要准确，只能除去较短的激发光波，对波
长较长的荧光没有影响。

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