多功能相衬荧光显微镜的应用

多功能相衬荧光显微镜的应用-细胞研究光学仪器

  应用暗视野或相衬显微镜可看到活的未染色的微生物。暗视野显微
镜中有一个暗视野挡光板（环形光栏），聚光器只能把中空的光锥汇聚
到样本上，使得仅被样本反射或散射的光线才能进人目镜，使得微生物
样本就像反衬在黑暗背景上的明亮物体，但无法看清楚其内部结构细节。
相衬显微镜的聚光器通常也用一个环孔挡板产生有一定角度的斜光，

  当斜光汇聚到样本平台，通过细胞的部分光线被折射，而汇聚成像
；而未折射的光进人镜筒后使其汇聚在预设相位板的特定区造成相位移
动；从而使得折射的光与未折射的光之间存在位相差（光程差），由于
光的衍射与干涉效应从目镜看去样品就与背景反差加大。相衬显微镜下
细胞的各种结构细节可由不同亮（暗）度表现出来，

  在荧光显微镜中，生物样品用一种荧光物质直接或间接（如通过抗
体）附着，荧光物质吸收紫外线（激发光）后发出可见光，所发光的颜
色与所采用的荧光物质有关；如荧光素吸收495 nm波长的紫外线后发出
黄绿色（波长525nm ）的可见光线。此技术采用紫外光源（如汞弧灯等），

  并有滤光片系统，可使紫外光投射在样品上，但仅荧光或可见光可
进人目镜而被观察到。

  应用荧光显微镜除可研究被荧光染色的成分分布外也可直接观察生
物样品中天然荧光物质（如叶绿素）。

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