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【干货分享】昊诺斯第九期“组织研磨和样品处理分享、讨论”
这一期我们为大家提供的案例是“石榴皮研磨提取RNA”：
实验：石榴皮研磨提取RNA
实验地点：武汉某生物公司
试验样品：石榴皮样品
1、将石榴皮剪成小碎块冻存，实验时取出放入圆底离心管，单管放入体积不超过离心管体积的1/3；
2、在离心管中加入硬质不锈钢研磨珠，盖好管盖，与适配器一起放入液氮然后取出；
3、将取出后的适配器安装在TL2010S中通量组织研磨仪上，参数设置为一定转速，研磨一定时间。
在昊诺斯销售工程师对以上案例简单讲解之后，用户们在“昊诺斯鼎昊源组织研磨分享”群内进行了热烈的分享、讨论：
用户：石榴皮含有果胶吧？
昊诺斯：应该含有少量果胶，其实石榴皮也算是植物样品中的一类。
用户：果胶纤维素的存在对检测过程有影响吗？
昊诺斯：研磨的方法与研磨叶片相同。
用户：我看看。
昊诺斯：应该不会有影响，现在的RNA提取试剂还是挺成熟的。
用户：时间不一样吧。
昊诺斯：您是说研磨时间？
用户：嗯，知道了，还有提取试剂存在。
昊诺斯：石榴皮冻过液氮以后还是很好研磨的。
用户：前面的负八十有必要吗？后面直接液氮了？
昊诺斯：前面的-80是保存样品。
用户：前面的负八十有必要吗？后面直接液氮了？我也有同样的疑问。
用户：负八十是为了降低空气体积吧，免得液氮时爆开。
昊诺斯：这个使用的客户也是服务公司，样品都是别的客户提供的。
昊诺斯：也有这方面的原因。
用户：液氮的温度是多少度？
用户：我想问管和钢珠需要depc水处理吗？
昊诺斯：负一百九十多。
用户：这个是必须的吧，196。
昊诺斯：如果提取的是RNA，是必须处理的。
用户：那我想问问有没有替代离心管的适配器？我一用就裂管。
用户：换管子材料吧，能禁得起冷冻的。
用户：你们用哪一种牌子的？
昊诺斯：我们的经验是选用圆底2ml离心管，减少液氮冷冻时间，缩短组织研磨仪研磨时间，或者换个牌子的离心管。
用户：我都试过了，就在组织研磨仪研磨后发现裂了，所以想问问你们用什么牌子。
昊诺斯：哪位老师用的管效果还可以，可以介绍一下。
用户：我们用的一直都不错，也出现过裂管。
昊诺斯：据用户说这款的不错。
昊诺斯：还有eppendorf的。
用户：进口的？无须灭酶了？
用户：然后就调低组织研磨仪转速1000吧，延长打样时间。
昊诺斯：进口的，第一个是Thermo的。
用户：其实我个人觉得RNA也没有想象的那么恐怖。
用户：哦哦，谢啦。
用户：三无的管子。
用户：裂管是因为温差变化太大么？
用户：就是不清楚。
用户：有个疑问啊，DNA和RNA能实现分离吗？
用户：钢珠用酒精泡泡，提的RNA就OK。
用户：组织研磨仪能否控温？
昊诺斯：现在好像有种提取液可以实现。
用户：管子裂是因为液氮下塑料变得脆了，然后高速钢珠一冲撞就裂了。
用户：为什么要分离呢？样品很珍贵？
用户：您的意思是先提取DNA，然后继续利用提取完的原材料来提取RNA？
用户：塑料材质达不到低温保护。
用户：提完分别用对应的酶处理这样技能保证量也能保证质。
用户：不是，我的意思是两者有没有分离干扰？
用户：用trizol说明书上说是可以DNA和RNA分离。
昊诺斯：应该是没有，之前我问过一个客户，用组织研磨仪研磨一次，用特定的提取液，可以同时提取DNA和RNA。
用户：同一样品可以同时提取。
用户：提 RNA不如DNa省事。
用户：我们打样裂过后采取的措施第一减低组织研磨仪转速，打样后然后再冻再打，延长打样时间；二把样品分装两管打样后加上TRIZON再合并。
用户：嗯，看来提取剂的选择性已经非常高了。
昊诺斯：您可以先降低下组织研磨仪研磨速度，比如1900转或者1800转，试下。
用户：我用的是1700。
用户：速度关系不大，是温度导致的。
用户：那如何是好？
用户：只能换管子材料。
昊诺斯：嗯嗯，就像吕老师说的，可以研磨比如30s，取出后再冻液氮，然后再磨，少量多次。
用户：国外进口的不知道现在怎样，之前也碎过好几个，把老板心疼坏了。
昊诺斯：进口的应该效果会好一点，毕竟国内的良莠不齐。
用户：当时还不是研磨，只是离心。
用户：有个疑问：离心管有金属材料的么？
用户：感觉应该有，但没见过。
昊诺斯：我们有5ml不锈钢的研磨管。
用户：容积大的我们也有，但是1.5的没见过。
用户：304材质的可以，耐低温和高温。
用户：不锈钢的成本太高吧，会不会引进交叉污染？
用户：但是不锈钢的可以重复使用呀，灭菌即可。
昊诺斯：清洗消毒干净，应该不会交叉污染。
用户：304的很耐操的。
昊诺斯：304很耐腐蚀。
昊诺斯：盖是什么材质的？
用户：标配是聚乙烯，可选配硅橡胶。
用户：应该挺成熟了。
用户：现在可以适配上这个机器吗？
昊诺斯：看介绍和2ml离心管的尺寸一样，应该可以。
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