DNA电子显微镜技术的应用,精细菌体科研光学仪器

DNA电子显微镜技术的应用,精细菌体科研光学仪器

DNA的电子显微镜观察

  与一般的手段不同，DNA的电子显微镜检查是一种简
单、迅速而又可靠的技术。由于可以对单个分子进行观察，
并且所有的分子都可以观察到，所以，它能很好地补充凝胶
电泳技术的不足。在凝胶电泳中，看到的是长度相同的一群
分子。电镜除了可用于DNA的一般观察以外，还可进行异
源双链的检查，从而确定非同源区的位置。

原理
用水样法和醋酸铀染色法观察DNA。
这是一项非常快速的方法，当需要用定性的方法确定
一个DNA样品的分子大小或结构拓朴学时非常有用。第二部
分将集中讨论异源双链的形成以及用甲酰胺法观察异源双
链。起初，可用噬菌体进行异源双链分析。后来，可以对实
验过程中产生的缺失进行定位。

实验步骤
  1．演示检查电子显微镜。
  2．按照实验方法二十七，在电镜下观察用水样法制备的
DNA样品。DNA应事先准备好。
  3．按照实验方法二十八在电镜下观察用甲酰胺法制备
的DNA样品。用于异源双链分析的噬菌体原液应事先准备
好。

  4．用最好的铜网样品，摄下异源双链的图像。

  5．对感兴趣的噬菌体进行电子显微镜异源双链分析

这是一个可靠的方法，但是需要较长的离心时间。
污染的DNA、RNA和某些蛋白质在16小时之内不会达到平
衡，它们会分布于整个梯度。这种方法的优点是，噬菌体在
一个远没有上述方法所用的那样陡的梯度中即可到达平衡密
度。如果噬菌体制备物是不均一的，即噬菌体含有的DNA
大小不同，结果所观察到的噬菌体带就会不只一条。
  观察·个微弱噬菌体带的最好方法是，用一条来自于显
微镜光源的平行光，从离心管的上部照射下来。在离心管的r
背面放一个平的黑色背景也有利于观察。

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