原生质体培养技术有多种最常用固体平板方法

原生质体培养技术有多种最常用固体平板方法

  酶解后可将材料经过一个有合适孔径的不锈钢网或尼龙布过滤
和离心以除去酶液。碎片和细胞。未消化的组织，然后再加新的渗
透压稳定液或培养液和反复离心以洗净酶液和碎片，也可以采用漂
浮法、两相法等进行原生质体纯化，制备出的原生质悬浮液应取样
在显微镜下检查，或用低渗溶液观察是否破裂，

  最好是用荧光增白剂来鉴定脱壁的效果。如仍有残存的细胞壁
则在紫外光照射下镜检可见到荧光，如果是原生质体则没有荧光。
然后再取样测定原生质体的活力，可用活体染色、观察有无胞质环
流，测定光合作用。  呼吸作用等、较好的方法是用荧光双醋酸酯
(FDA)染色

原生质体培养方法
  原生质体的培养方法有多种。最常用的是固体平板法，简易方
便又可定点观察。其他如悬滴培养、液体浅层培养。双层培养(液
体／固体。固体／固体)、x平板培养、固体小块培养、混合培养等
都可根据试验需要选择采用，原生质体的培养基通常是参考细胞或
组织培养的培养基修改而来，主要的差异是：原生质体培养基中需
加有一定量的渗透压稳定剂，生长素和激动素或其他植物激素的种
类和浓度也可参考细胞或组织培养的培养基而修改：有的植物材料
，虽然参考其细胞或组织培养基而设计出了原生质体培养基也不能
解决问题，原因有待探寻。

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