配备相差显微镜高倍镜观察浓缩微生物数量样品

配备相差显微镜高倍镜观察浓缩微生物数量样品

制备湿片
  实际上，酿酒师没有时间从样品中分离微生物后再进行观察，
如果配备一台相差显微镜，样品制成湿片后很容易观察。一般来说
，显微镜能看清微生物的最低数量要求为104次方个／mL，因此，
应该调整显微镜的视野和／或浓缩样品，使微生物数量达到要求。
  1．用接种环或者滴管，取一滴葡萄汁或葡萄酒于洁净的载玻
片上。如果果汁或酒中的微生物数量比较低，可以采用不断离心的
方法进行浓缩。离心时，用锥形离心管取10mL样品，3000×g离心1
5min，离心后倾去上清液，玻棒搅匀沉淀物，然后用巴斯德滴管吸
取一滴沉淀物放置在玻片上。
  2．放一个盖玻片在吸取的液体上，做成湿片，然后分别用低
倍镜和高倍镜观察。短期内保存，可以用凡士林封住盖玻片四周，
防止湿片干燥。12．6制备霉菌的玻片培养物
  霉菌的鉴定主要依赖于形态学特征，霉菌的生长培养基对其形
态具有非常大的影响。如果霉菌生长杂乱无章，显微镜观察起来也
很困难。制备湿片，对细菌和酵母菌来说意义不大，但对于霉菌，
它则是一个典型的培养方法，制作过程如下。湿片的优点在于染色
后对微生物的机械损伤最小。
  1．将A、B液等体积混合，配制乳酚一苯胺蓝染料：
  a．A液：将lOg苯酚与lOmL蒸馏水缓慢混合，完全溶解后，加
入10mL乳酸和10mL甘油；
  b．B液：配制苯胺蓝饱和溶液，取10mL染料，加入10mL甘油和
80mL蒸馏水。

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