光学显微镜

光学显微镜-不同的化合物染色来增强对比度
 
  早期使用显微镜观察的样品通常是活的，或者说至少短时间是
活的。固定和染色技术随着显微镜的进步而发展。由于显微镜光学
的改进，光学系统的局限性确定了样品制备的必要性。显微镜研究
者根据光学的局限性作出了适当的让步。放大、数值孔径值、分变
率限度、工作距离和色彩偏差纠正被认作为相关因素。另外，各种
照明方法包括亮视野、暗视野、相差和荧光相继被引入主流显微镜
。随着这些类型显微镜的利用，人们接受了这样一个事实：即样品
需要制备成能满足显微镜光学局限的要求。通常大多数这些的制备
需要固定样品。

  用相机与显微镜结合使用来证实影像。常规的胶片照相显微镜
适用于大多数亮视野、暗视野和荧光显像，因为曝光时间易于满足
。在有必需特殊设备的实验室将活细胞制成胶片，这些胶片的大多
数使用亮视野方式制成，因为胶片的显影需要较大光强度，由于染
料的毒性和长时间曝光的光毒作用，不可能制成活细胞荧光胶片。
  虽然与存活样品相比，固定的细胞产生的信息较少，但也有一
些优点。固定的细胞更扁平，持续时间更长，它们不能运动，也不
需要持续的饲养，能用不同的化合物染色来选择性地增强对比度。
大多数抗褪色溶剂与固定细胞(但不是活细胞)是相容的
  当活细胞的影像被记录在常规胶片上时，显微镜工作者被胶片
的敏感度和分辨率所限定，同时也限定了实验的种类。，当与现代
的、增强的或冷的电荷偶联装置(ch辨coupled device，CCD)摄像
机和光电倍增管扫描技术相比时，胶片有许多局限性。因此，早期
活细胞池受到了相关技术固有地限定。早期的显微镜并没有现代显
微镜的图像对比

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