用相差显微镜检查培养瓶，观察细胞生长或形态

用相差显微镜检查培养瓶，观察细胞生长或形态

制备琼脂平板
  1b．在电阻为10(或更高)的蒸馏水或去离子水中，依照生产商
提供的处方制备胰酶解酪蛋白大豆琼脂、Sabouraud葡萄糖琼脂和Y
M琼脂。用一个至少两倍于培养基的耐高压容器盛放培养基(如用2L
锥形烧瓶Erlenmeyer盛lL培养基)，可避免高压消毒过程中液体溢
出。在缓慢排气或液体循环程序中，121℃高压蒸汽灭菌培养基15r
ain。于近50℃水浴冷却。无菌条件下，以50ral／L(5％)比例，将
去纤维蛋白羊血加入到胰酶解酪蛋白大豆琼脂中。无菌条件下，在
lOOmmX 15mm一次性无菌塑料平皿中分装培养基，24ml／111]．。1
0～20个平板叠放在…慈，室温冷却凝固，过夜。然后装入有通气
孔的塑料袋内，4～8℃储存，质控检查后备用(保质期12周)。冷冻
安瓿的样品制备：用1支lml血清学吸管从准备细胞冷冻的各个管中
取细胞悬液约5％，均匀混合。
细胞培养瓶：用低倍倒置显微镜，

最好是相差显微镜，逐一检查培养瓶，观察细胞生长或形态是否有
异常。无菌条件下从可疑污染的培养液中吸取5ml培养上清液做进
一步检查测试。隔离可疑的培养物或器皿，确保它们不与洁净物品
产生交叉污染。8．湿封待测的样本，然后在油镜(放大率≥1000×
)下检查。9．如果培养液中含抗生素，在进行培养基微生物检测之
前洗涤细胞。20009离心20min
  (室温或4～8℃)，去掉上清液，用不含抗生素的培养基重悬沉淀
。如此步骤需重复
  3次，彻底清除微量的抗生素，以免干扰微生物培养。

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